ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИПМех РАН |
||
Важным показателем состояния здоровья человека является уровень катехоламинов и их метаболитов в биологических жидкостях: при различных заболеваниях эти соединения либо секретируются в повышенных количествах, либо их концентрации в организме снижаются; контроль этих процессов можно использовать в диагностических целях [1]. Известные в настоящее время методы определения катехоламинов и их метаболитов, например, хроматографические или электрохимические, отличаются высокой стоимостью и/или недостаточной чувствительностью и сложностью проведения анализа, а при флуоресцентном анализе биообразцов возможна частичная деструкция аналитов, что приводит к искажению результатов анализа [2, 3]. Целью настоящей работы явилась разработка новой твердофазной индикаторной системы на основе образования тройного комплекса катехоламинов или их метаболитов с комплексом европия с окситетрациклином, иммобилизованным в пленке хитозана в ячейках полистирольного планшета, для высокочувствительного флуориметрического определения указанных соединений в биологических жидкостях. Для решения поставленной задачи подобрали подходящий буферный раствор определенной природы и рН, природу и концентрацию поверхностно-активного вещества, (указать!), соотношение концентраций европия и окситетрациклина, а также длины волн возбуждения и испускания. Исследовали стабильность иммобилизованного в пленке хитозана комплекса европий-окситетрациклин во времени при хранении в холодильнике при 4 °С. В выбранных условиях разработали методики высокочувствительного (до 1.0 фМ) определения норэпинефрина, дофамина, эпинефрина, гомованилиновой, ванилилминдальной 5-гидроксииндолуксусной кислот, серотонина, норметанефрина и L-диоксифенилаланина. Изучили влияние на результаты определении катехоламинов и их метаболитов матричных компонентов мочи и плазмы крови. Разработанные методики апробировали на примере определения норэпинефрина в плазме крови крыс, подвергшихся водной и пищевой депривации. [1] I. A. Veselova, E. A. Sergeeva, M. I. Makedonskaya, О. Е. Eremina, S. N. Kalmykov and Т. N. Shekhovtsova, J. Anal. Chem., 2016, 71, 1235. [2] B. M. Fonseca, M. Rodrigues, A. C. Cristóvão, D. Gonçalves, A. Fortuna, L. Bernardino, A. Falcão and G. Alves, J. Chromatogr. B, 2017, 1049-1050, 51. [3] H. Y. Wang, Q. S. Hui, L. X. Xu, J. G. Jiang and Y. Sun Anal. Chim. Acta, 2003, 497, 93.