ИСТИНА

Углеводы являются наиболее распространенными органическими соединениями в природе. Сахара и полиолы играют активную роль в регуляции роста, в процессах фотосинтеза и синтеза белков, в углеводном и липидном обмене, осмотическом гомеостазе и экспрессии генов. Большое количество сахаров и полиолов обладает высокой биологической активностью не только по отношению к микроорганизмам и растениям, но и для организма человека. Кроме того, благодаря наличию этих соединений многие растения обладают антиоксидантным действием. В данной работе разработан метод извлечения 17 сахаров и полиолов из хвойных растений при помощи ультразвуковой экстракции и метод их определения с использованием гидрофильной хроматографии с тандемным масс-спектрометрическим детектированием. Оптимизация параметров экстракции осуществлялась с использованием экспериментального дизайна ортогональных массивов для следующих параметров: концентрация метанола в экстрагенте, длительность экстракции, степень измельчения растительного материала (иголок) и температура экстракции. Определены оптимальные условия ультразвуковой экстракции: концентрация метанола – 30 %, время экстракции – 30 мин, степень измельчения – II (измельченные иголки размером от 2 до 4 мм), температура экстракции – 60 °С. В работе показано, что с использованием масс-спектрометрического детектирования и разделения методом ВЭЖХ можно добиться рекордно низких пределов обнаружения и превосходных аналитических характеристик метода без дериватизации. Степень извлечения аналитов из растительного материала определялась методом последовательной экстракции для подтверждения результатов. Открываемость растительного материала подтверждена методом «введено – найдено». Аналитический метод валидирован по следующим параметрам: правильность, претенциозность, линейность, предел обнаружения и количественного определения. Разработанный подход апробирован на 5 видах лесообразующих хвойных растений России, высокая степень извлечения подтверждена методом последовательной экстракции.