ИСТИНА

Разработан лабораторный технологический регламент получения функциональной системы скрининга противоопухолевых препаратов на основе анализа белкового фактора PARP1. Были получены экспериментальные образцы ЭО№№1-4. ЭО группы 1 представляют собой бесклеточную систему транскрипции in vivo, в которой присутствует фактор PARP1. Анализ в данной системе проводится с помощью биохимического анализа продуктов транскрипции (меченных изотопной меткой) в ПААГ в денатурирующих условиях. ЭО группы 2 представляют собой бесклеточную систему транскрипции in vivo, в которой присутствует фактор PARP1. Анализ в данной системе проводится с помощью биохимического анализа методом ДНКаза1 футпринтинга с последующим ПААГ в денатурирующих условиях. ЭО группы 3 представляют собой бесклеточную систему транскрипции in vivo, в которой присутствует фактор PARP1. В отличие от ЭО№1 и ЭО№2, в данной системе проводят кинетические измерения при помощи прибора KinTek на временах 3’’, 10”, 45”, 2’, 5’, 10’. Анализ в данной системе проводится с помощью биохимического анализа продуктов транскрипции ( меченных изотопной меткой) в ПААГ в денатурирующих условиях. Экспериментальные образцы группы 4 представляют собой системы, меченные не изотопной, а флуоресцентной меткой и предназначенные для проведения FRET анализа экспериментальных образцов по исследованию связывания PARP1 с нуклеосомой. Разработана программа и методики исследовательских испытаний экспериментальных образцов. Разработана методика контроля качества и анализа экспериментальных образцов. Проведены испытания экспериментальных образцов группы 1-4 в соответствии с Программой и методиками исследовательских испытаний (данные на рисунках). По результатам анализа образцы группы 1 и группы 4 выбраны в качестве прототипов для создания функциональной системы скрининга ингибиторов PARP1.