ИСТИНА

В настоящее время предпринимаются попытки усовершенствования неинвазивного метода аутофлуоресценции (АФ) глазного дна - перспективного метода диагностики различных зрительных патологий. В его основе лежит получение изображения, создаваемого флуоресценцией липофусциновых гранул (ЛГ), которые накапливаются в клетках ретинального пигментного эпителия (РПЭ). Флуоресцентные свойства ЛГ обусловлены наличием в них флуорофоров - бисретиноидов (А2Е и др.) и продуктов их фотоокисления и фотодеградации (A2Edeg). Нами было показано, что с возрастом и при патологии в составе ЛГ повышается относительное содержание A2Edeg, но только в случае патологии наблюдается смещение максимума их флуоресценции в коротковолновую область. Чтобы использовать спектральные характеристики АФ для усовершенствования этого диагностического метода, важно определить соответствие времен жизни флуоресценции (ВЖФ) со спектральными характеристиками флуорофоров ЛГ. Целью данной работы была регистрация кривых затухания флуоресценции (КЗФ) хлороформного экстракта из ЛГ при различных длинах волн возбуждения и детектирования. Это было необходимо для выявления различных групп флуорофоров и определения их вклада в суммарную флуоресценцию хлороформного экстракта ЛГ из клеток РПЭ кадаверных глаз человека в норме. Кадаверные глаза человека были получены из Глазного тканевого банка ФГБУ МНТК “Микрохирургия глаза” им. академика С.Н. Федорова Минздрава России. Измерения ВЖФ проводили при помощи метода подсчета коррелированных во времени фотонов. Путем двухэкспоненциального анализа полученных КЗФ показано наличие двух компонент с ВЖФ τ2=1,4 нс и τ1=6,8 нс, для которых были рассчитаны спектры флуоресценции. Показано, что веществам с более короткоживущей флуоресценцией (ВЖФ τ2) соответствует более длинноволновый максимум флуоресценции, чем для веществ с τ1. (ВЖФ τ1). Из этого следует, что веществам с ВЖФ τ2, соответствуют неокисленные бисретиноиды, у которых максимум флуоресценции более длинноволновый, а веществам с ВЖФ τ1,у которых максимум флуоресценции более коротковолновый, соответствуют окисленные бисретиноиды (A2Edeg). Окисленные бисретиноиды вносят в суммарную флуоресценцию хлороформного экстракта ЛГ из клеток РПЭ больший вклад, по сравнению с неокисленными бисретиноидами.