ИСТИНА

Бактерии класса Mollicutes, одним из представителей которого является Mycoplasma gallisepticum, имеют ряд особенностей – отсутствие клеточной стенки, редукция генома. Уменьшение размера генома у этих бактерий привело и к редукции репертуара регуляторов экспрессии генов, но, несмотря на это, микоплазы сохранили способность адаптироваться к изменяющимся условиям среды. Для M. gallisepticum известно о наличии одного главного и одного альтернативного сигма факторов, показано взаимодействие репрессора HrcA с CIRCE элементом генов теплового стресса; с помощью биоинформатического анализа предсказано наличие восьми факторов регуляции транскрипции, однако мишени этих регуляторов не найдены. DCW (Division and Cell Wall) кластер включает в себя высококонсервативные среди бактерий гены клеточного деления и синтеза клеточной стенки. Молекулярная функция большинства компонентов DCW кластера известна, однако роль первого гена кластера – mraZ, долгое время оставалась неясна, и лишь в 2014 году для Escherichia coli была показана способность MraZ связываться с ДНК и выступать в качестве репрессора генов DCW кластера. Сохранение этого гена у молликут, вероятно, указывает на важную роль этого белка и, на фоне общей редукции регуляторного аппарата, может вносить больший вклад в регуляцию, чем у бактерий с расширенным спектром модуляторов. Белок MraZ M. gallisepticum был получен с рекомбинантной молекулы ДНК в кишечной палочке. С помощью метода торможения ДНК в полиакриламидном геле был идентифицирован сайт связывания белка с дцДНК из промоторной области DCW кластера, состоящий из трёх прямых повторов; показана роль длины спейсера между повторами и влияние мутаций в сайте на эффективность взаимодействия с белком. Стехиометрия ДНК-белкового комплекса была установлена с использованием эксклюзионной хроматографии. Для подтверждения влияния белка MraZ на экспрессию генов DCW кластера и выявления фенотипических эффектов, были получены трансформанты M. gallisepticum со сверхэкспрессией гена mraZ. Таким образом, впервые для M. gallisepticum экспериментально подтверждено наличие белка-активатора клеточного деления, что вносит существенный вклад в раскрытие регуляторных событий у бактерий с редуцированным геномом и указывает на важность синхронизации процесса деления. Работа поддержана грантом РНФ (№ 14-24-00159)