ИСТИНА

Болезнь Альцгеймера (БА) является прогрессирующим нейродегенеративным заболеванием, которым страдают десятки миллионов человек в мире. Согласно ведущей гипотезы возникновения и развития БА, известной как «амилоидный каскад», в основе патогенезе БА лежит агрегация бета-амилоидного пептида (Абета). Общепринято, что полноразмерный Абета длиной 42 аминокислотных остатка (Абета42) играет центральную роль в формировании патогенных агрегатов Абета. Подавляющее большинство исследований, посвящённых механизмам агрегации Абета, а также нейротоксичности различных типов агрегатов, выполнено в условиях in vitro с использованием синтетических пептидов. В силу высокой склонности синтетических пептидов Абета42 к агрегации, получение водно-солевых растворов Абета42 в мономерной форме является сложной задачей. Используя метод фото-индуцированной ковалентной стабилизации («сшивка») агрегатов Абета с использованием трис-(бипиридил)-рутения(II) с последующим их фракционированием денатурирующим ПААГ-электрофорезом, был проведён экспериментальный анализ агрегатного состояния Абета42. Анализ показал, что в растворах пептида происходит практически мгновенное формирование низкомолекулярных олигомеров Абета, до гептамеров включительно, которые находятся в динамическом равновесии с мономерами. Формирование олигомеров происходит одинаково в растворах Абета42, полученных как растворением пептида в диметилсульфоксиде, так и растворением в щёлочи с последующей ультрафильтрацией, позволяющей удалить все олигомеры пептида выше димеров. Установлено, что доля пептидов Абета42, находящихся в составе олигомеров, составляет 17-24%, при этом количественно доминируют такие олигомеры, как тетрамеры, пентамеры, гексамеры и гептамеры. При повышении размера агрегатов Абета42 (определённого как кажущийся диаметр агрегатов методом корреляционной спектроскопии) выше 10 нм спектр олигомеров сдвигался в область высокомолекулярных олигомеров. Показано, что формирование фибриллярных агрегатов приводит к уменьшению доли Абета42 в мономерном и олигомерном состоянии и появлению фракции пептида, трудно растворимой в ионном детергенте Na-SDS. Транкированная форма Абета длиной 16 аминокислотных остатков (Абета16), представляющая его металл-связывающий домен, формирует SDS-индуцированные мицеллы, что делает невозможным исследование цинк-индуцированной олигомеризации Абета16 методом ковалентной фотоиндуцированной «сшивки». Исследование поддержано Министерством науки и образования РФ (Соглашение № 14.604.21.0074, уникальный идентификатор RFMEFI60414X0074).