ИСТИНА

В опытах на изолированных внутрилегочных артериях (ЛА) второго порядка нами было показано, что в норме при низких концентрациях донора NO расслабление ЛА может осуществляться через каналы семейств Kir и Кv без вовлечения пути, опосредованного растворимой гуанилатциклазой (рГЦ). При моделировании односторонней полной окклюзии общей сонной артерии взаимодействие NO-индуцированных рГЦ-зависимых и рГЦ-независимых механизмов вазодилятации изменялось - ингибитор рГЦ приводил к большему подавлению NO-индуцированного расслабления. Это указывает на увеличение роли пути, зависимого от рГЦ при прекращении кровотока по одной общей сонной артерии, что может быть следствием снижения вклада рГЦ-независимого NO-индуцируемого пути, то есть активации калиевых каналов напрямую NO. Мы предположили, что отсутствие кровоснабжения хеморецепторов каротидных телец сонной артерии, по аналогии с реакцией на альвеолярную гипоксию, приводит к уменьшению плотности K+-каналов на клеточной мембране гладкомышечных клеток ЛА. Целью исследования было: выявить вклад рГЦ-зависимого и рГЦ-независимого путей NO-индуцированного расслабления для ЛА при моделировании односторонней полной окклюзии общей сонной артерии и оценить изменение параметров, которые могут указывать на развитие легочной гипертензии – относительный вес правого желудочка сердца, систолическое давление в правом желудочке сердца (СПЖД), толщину медии ЛА второго порядка. У самцов белых беспородных крыс в возрасте 2 месяцев перевязывали и пересекали левую общую сонную артерию. Через 1 месяц после операции крыс наркотизировали и измеряли СПЖД; извлекали сердце для измерения отношения массы правого желудочка к общей массе желудочков и межжелудочковой перегородки, долю правого легкого для гистологического исследования и левое легкое для проведения эксперимента на изолированных ЛА второго порядка. Контрольная группа состояла из интактных крыс того же возраста. Изолированные ЛА перфузировали в режиме постоянного потока. Дилятацию при перфузии донором NO - нитропруссидом натрия (SNP, 10-11 - 10-7 М) тестировали на фоне тонического сокращения в ответ на перфузию раствором серотонина (510-6 М). Степень расслабления оценивали на фоне ингибитора рГЦ — 1H-[1,2,4,oxadiazolo[4,3-a]quinoxalin-1-one (ODQ, 10-6 М) и блокаторов калиевых каналов - глибенкламида для АТР-чувствительных K+-каналов (510-6 М) и тетраэтиламмония (ТЕА, 5 мМ) для потенциалзависимых K+-каналов. Для анализа состояния механизмов вазодилятации, зависимых от цГМФ, оценивали дилятацию при перфузии блокатором фосфодиэстеразы V (Zaprinast, 10-6-310-5 М) на фоне сократительного ответа на перфузию раствором серотонина. В контрольной группе при применении блокатора рГЦ статистически значимое подавление расслабления наблюдали в диапазоне концентраций SNP от 10-8 до 10-7 М, значимое подавление расслабления при применении антагониста АТР-чувствительных K+-каналов было выявлено в диапазоне концентраций SNP от 10-10 до 10-8 М, а ТЭА подавлял вазодилятацию в ответ на SNP в диапазоне концентраций от 10-9 до 10-7 М. То есть, в норме рГЦ-опосредованный путь приобретает значение для легочных артерий только при достаточно высоком уровне NO. Реализация NO-зависимого расслабления при более низких концентрациях SNP зависит от блокады АТР-чувствительных K+-каналов: значимое подавление расслабления под действием глибенкламида проявлялось с концентрации SNP 10-10 М. В опытной группе, наоборот, глибенкламид практически не влиял на эффективность NO-индуцируемого расслабления, но было получено более выраженное снижение ответа на SNP под действием ODQ - подавление расслабления в ответ на донор NO наблюдали во всем диапазоне исследуемых концентраций (p<0,05). Это свидетельствует о возрастании роли пути, зависимого от рГЦ при прекращении кровотока по общей сонной артерии. Этот результат может быть объяснен снижением вклада NO-индуцируемого, но не зависимого от рГЦ пути – то есть активации калиевых каналов напрямую NO. У крыс с пересеченной общей сонной артерией было отмечено статистически значимое снижение ответа на SNP в опытах с ТЭА в значительном диапазоне концентраций - от 10-10 до 10-7 М. С другой стороны, расслабление ЛА в ответ на селективный блокатор фосфодиэстеразы V не отличалось у крыс в опытной и контрольной группе. Наблюдаемые изменения указывают на перераспределение вклада калиевых каналов цитоплазматической мембраны в NO-индуцированную дилятацию, но не на снижение эффективности внутриклеточных процессов, зависимых от протеинкиназы G. Таким образом, отсутствие перфузии хеморецепторов каротидных телец сонной артерии может привести к последствиям, сходным с реакцией на экзогенную (или альвеолярную) гипоксию – снижению экспрессии K+-каналов, участвующих как в рГЦ-зависимом, так и рГЦ-независимом пути дилятации в ответ на NO. Уменьшение плотности K+-каналов может способствовать деполяризации и входу Ca2+ в клетку, что в свою очередь может вести к развитию легочной гипертензии. В наших экспериментах не было получено доказательств гипертрофии правого желудочка сердца, однако было выявлено повышение СПЖД (медианы равны соответственно 30,0 и 35,9 мм рт. ст, p<0,05) и увеличение площади медии ЛА второго порядка – в среднем на 65%, p<0,05. В связи с этим мы предполагаем наличие механизма, опосредованного нервной системой, который реализуется через хеморецепторы сонных артерий, реагирующие на гипоксию, и приводит к эффекту, сходному с прямым действием альвеолярной гипоксии на гладкие мышцы легочных артерий.