ИСТИНА

Многие заболевания центральной нервной системы сопровождаются хроническими воспа- лительными процессами, активную роль в регуляции которых выполняют глиальные клетки мозга. Наряду с микроглией, астроциты являются активными участниками системы врожденного иммуни- тета центральной нервной системы, они способны экспрессировать и распознавать широкий спектр различных цитокинов: фактор некроза опухоли-альфа (TNFα), IL-6 (интерлейкин-6), IL-10, IL-1α и др., а также различные молекулярные паттерны, способные активировать систему Toll-подобных рецепторов (TLR) [1]. Важную роль в воспалительном ответе астроцитов играют полиненасыщенные жирные кис- лоты, (такие как арахидоновая кислота, докозагексаеновая кислота и эйкозапентаеновая кислота), а также их производные, оксилипины, образующиеся через циклооксигеназный, липоксигеназный и эпоксигеназный путь метаболизма [2]. Показано, что изменение метаболизма оксилипинов связано с различными заболеваниями, в том числе связанными с изменением энергетических процессов в организме, таких как ожирение, диабет, метаболический синдром. Было показано, что адаптация астроцитов к различной концентрации глюкозы в среде влияет на воспалительный ответ [3]. Однако влияние адаптации астроцитов к повышенной концентрации глюкозы на синтез оксилипинов в клет- ках ЦНС не изучено. Целью нашей работы являлось сравнение клеточного ответа астроцитов, адаптированных к различной концентрации глюкозы при стимуляции клеток липополисахаридом (агонист TLR4) и IL- 1α (агонист рецептора IL-1). Исследование проводилось на культурах эукариотических клеток: первичных астроцитах крыс, которые стимулировались на 10-14 день культивирования после выделения из головного мозга новорожденных животных. В работе использовалась модель длительной (10-14 дней) и крат- ковременной (48 ч) адаптации астроцитов к среде с нормальной (5,5 мМ) и с повышенной (25 мМ) концентрацией глюкозы. Затем клетки стимулировались липополисахаридом (100 нг/мл) или IL-1α (5 нг/мл). Профиль оксилипинов во внеклеточной среде определялся методом ВЭЖХ-МС/МС с помо- щью тройного квадрупольного масс-спектрометра Shimadzu 8040. Липидные компоненты выделя- лись методом твердофазной экстракции с использованием колонок Oasis HBL. Соединения были идентифицированы и количественно определены путем сравнения их масс-спектрометрических и хроматографических данных с данными, полученными для соответствующих стандартов оксилипи- нов с использованием программного обеспечения Lipid Mediator Version 2 (Shimadzu, Япония). В клеточном супернатанте было идентифицировано 39 соединений, производных арахидо- новой, докозагексаеновой, эйкозапентаеновой и линолевой кислот. Результаты эксперимента пока- зывают, что при стимуляции клеток IL-1α при длительной адаптации астроцитов к повышенной концентрации глюкозы приводит к усилению синтеза простагландинов 6-keto-PGF1a и PGE2, и сни- жению синтеза тромбоксана В2 (TXB2). Повышенная концентрация глюкозы при стимуляции кле- ток липополисахаридом усиливает синтез метаболитов арахидоновой кислоты, в первую очередь, простагландинов PGE2 и PGD2. Полученные данные свидетельствуют о выраженном изменении синтеза оксилипинов при клеточной адаптации астроцитов к различной концентрации глюкозы в среде. Детальные молеку- лярные механизмы наблюдаемых эффектов требуют дальнейшего изучения. Исследование выполнено при поддержке гранта Российского научного фонда (проект № 20- 74-00068).