ИСТИНА

Целью данной работы является изучение способности rCathLTс гидролизовать коллаген I типа и эластин из кожи быка. Разработаны условия гидролиза коллагена и эластина rCathLTс. Методом электрофореза в ПААГ в денатурирующих условиях установлен факт гидролиза коллагена I типа из кожи быка rCathLTc и определены массы продуктов гидролиза. Изучен характер гидролиза коллагена I типа rCathLTc при разных соотношениях концентраций фермента и субстрата. Даже при соотношении [E]:[S] = 1:500 спустя 10 мин инкубации наблюдается заметное уменьшение интенсивности полос коллагена по сравнению с контролем. При увеличении концентрации фермента наблюдалось возрастание интенсивности гидролиза. Установлено, что при гидролизе коллагена I типа в первую очередь атаке подвергается  субъединица коллагена и продукты ее гидролиза. Было показано, что в первые 30 мин гидролиза происходит накопление продуктов с мол. массой порядка 45 кДа с последующим их исчезновением. Было замечено, что на протяжении всего времени инкубации скорость исчезновения полос, соответствующих 1 и 2 субъединицам, значительно меньше скорости исчезновения полосы, соответствующей  субъединице, что свидетельствует о меньшей специфичности rCathLTc к 1 и 2 субъединицам по сравнению с  субъединицей. Также, с использованием тринитробензосульфоновой кислоты подтверждено расщепление эластина из кожи быка rCathLTc, тестированное по приросту величины поглощения продуктов гидролиза при D420.