ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИПМех РАН |
||
Противоопухолевый препарат CBL0137 относится к группе кураксинов – низкомолекулярных соединений, карбазольное ядро которых интрекалирует между парами оснований ДНК, а боковые заместители взаимодействуют с большой и малой бороздками ДНК. Кураксины отличаются от большинства используемых в настоящее время ДНК-тропных химиотерапевтических препаратов тем, что они не вызывают химических повреждений ДНК, но при этом связываются с ДНК и способны предотвращать взаимодействие многих ферментов (топоизомераз, ДНК-метилтрансфераз) и гистонов с ДНК. Кроме того, в 2019 г. было показано, что CBL0137 глобально изменяет топологию генома. Механизмы влияния CBL0137 на связывание хроматин-модулирующих белков с нуклеосомой до сих пор остаются предметом активного изучения. В этом отношении особенный интерес вызывает фермент поли-АДФ-рибозо-полимераза 1 (PARP-1). PARP-1 одним из первых белков привлекается к месту повреждений ДНК, и за счет своей каталитической активности «разрыхляет» плотноупакованную ДНК в хроматине, тем самым, обеспечивая эффективное функционирование ферментов репарации. Повышенное содержание PARP-1 в опухолевых клетках поддерживает стабильность генома и защищает их от гибели, а ингибиторы PARP-1 являются перспективными противоопухолевыми агентами. В работе представлены данные исследований CBL0137 с использованием флуоресцентно-меченых нуклеосом, при связывании с которыми, происходит заякоревание (траппинг) PARP-1. С помощью spFRET микроскопии и анализа электрофоретической подвижности комплексов в геле были изучены структурные изменения, происходящие в нуклеосоме при одновременном воздействии PARP-1 и CBL0137 на нуклеосомном уровне. Обнаружено, что эффективность связывания PARP-1 c нуклеосомой зависит от присутствия и концентрации CBL0137 в реакции.