ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИПМех РАН |
||
Нестин-экспрессирующие мезенхимные стволовые/стромальные клетки (Nes+ МСК) контролируют активность гематопоэтических стволовых клеток, регулируя таким образом обновление крови. Однако роль таких клеток в поддержании состава других тканей, в частности, жировой ткани остается не выясненной. Целью данной работы было изучение роли Nes+ МСК в регуляции адипоцитарной дифференцировки МСК. Культивируемые МСК жировой ткани мышей линии Nes-GFP+ разделяли на 2 популяции – обогащенную Nes+ МСК и лишенную таких клеток. Неразделенную популяцию МСК использовали в качестве контрольной. Адипоцитарную дифференцировку индуцировали в течение 2 недель по стандартному протоколу. Перед фиксацией клетки фотографировали с использованием метода фазово-контрастной микроскопии и флуоресценции в зеленом канале для оценки изменения доли Nes+ МСКв ходе дифференцировки. Зрелые адипоциты выявляли как клетки, накапливающие краситель OilRed О. Через 2 недели инкубации в индуцирующей адипогенез среде в контрольных культурах МСК накапливаются адипоциты, содержащие крупные липидные капли. Такие клетки, как правило, расположены группами. В ходе исследования была обнаружена субпопуляция крупных клеток со слабой экспрессией нестина,которые после индукции дифференцировки накапливают крупные жировые капли, а также способны к спонтанной дифференцировке при культивировании в контрольной среде. В популяции, обогащеннойNes+ МСК, после индукции дифференцировки появляются клетки, содержащие мелкие липидные капли. При этом часть Nes+ МСК не накапливает липиды и не утрачивает экспрессию нестина. Такие клетки формируют сеть поверх пласта дифференцирующихся адипоцитов. Напротив, в популяции, лишенной Nes+ МСК,доля клеток, способных к адипоцитарной дифференцировке, оказалась снижена по сравнению с неразделенной популяцией МСК. Полученные данные свидетельствуют о том, что жировая ткань содержит Nes+ МСК, присутствие которых необходимо для адипогенной дифференцировки прогениторных клеток. Работа выполнена при поддержке гранта РФФИ № 20-015-00402.