ИСТИНА

Оксидаза D-аминокислот (DAAO, КФ 1.4.3.3) – это FAD-содержащий фермент, катализирующий реакцию окисления D-аминокислот кислородом в соответствующие α кетокислоты с выделением пероксида водорода и иона аммония. Данный фермент находит широкое практическое применение в различных областях биотехнологии и выполняет важные биохимические функции в живых организмах. Его используют в аналитической биохимии, в синтезе оптически активных соединений, для получения α кетокислот. Для практического применения необходимо производить оптимизацию свойств фермента дикого типа под цели и задачи конкретного процесса. Для DAAO как двух-субстратного фермента это обозначает, в том числе, изменение каталитических параметров, связанных с кислородом. Для этого необходимо уметь их эффективно определять. В нашей лаборатории был получен фермент дикого типа из дрожжей Trigonopsis variabilis (TvDAAO). В рамках данной работы была оптимизирована методика определения скорости убыли кислорода в ферментативной системе. Были исследованы полные кинетические кривые. В результате были определены истинные константы Михаэлиса фермента по кислороду и D-метионину.