ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИПМех РАН |
||
Электрофорез – это перемещение частиц под действием электрического поля. Электрофорез нашел широкое применение в биохимии для разделения белков и нуклеиновых кислот. Исторически, с развитием метода, время его проведения сокращалось, а разрешение росло. Сейчас наиболее используемым методом электрофореза белков является электрофорез в полиакриламидном геле в денатурирующих условиях с добавлением додецилсульфата натрия (SDS-PAGE). Основателями данного метода можно считать Ornstein [1] и Laemmli [2]. Цитируемость данных статей превышает 5000 и 250000 соответственно, что показывает значимость и актуальность метода SDS-PAGE. Обычно SDS-PAGE длится 1,5-2 часа. Уменьшение времени проведения электрофореза является важной и актуальной задачей для биохимии. Несколько компаний предлагают «быстрые» гели. Наиболее удобными из них являются гели TGXTM компании BIO-RAD, поскольку они могут быть использованы со стандартными Tris-глициновыми электродными буферами. Данные гели имеют высокую стоимость и недоступны для большинства биохимических лабораторий. В данной работе была разработана система для проведения быстрого SDS-PAGE. Удалось сократить время проведения электрофореза до 20-30 минут. Реактивы, используемые для разработанной системы, дешевые и доступны в любой биохимической лаборатории. Также преимуществом разработанной системы является ее совместимость с наиболее часто используемыми Tris-глициновыми электродными буферными системами. Литература 1. Ornstein L. Disc electrophoresis. I. Background and theory // Annals of New York Academy of Sciences. 1964. № 121 (2). с. 321-349. 2. Laemmli U. Cleavage of Structural Proteins during the Assembly of the Head of Bacteriophage T4 // Nature. 1970. № 227. с. 680–685.