ИСТИНА

Оксидаза D-аминокислот (DAAO) – это фермент, который катализирует реакцию превращения D аминокислот в соответствующие α-кетокислоты с образованием пероксида водорода и иона аммония. D-аминокислоты играют важную роль в регуляции жизнедеятельности различных организмов. Кроме того, в случае ряда заболеваний наблюдаются значительные изменения концентрации определенных D-аминокислот в тканях мозга, сыворотке крови и спинномозговой жидкости. Поэтому для ранней диагностики и мониторинга ряда заболеваний на основе DAAO могут быть использованы методы определения D-аминокислот в биологических образцах. Также DAAO используется в двухферметном процессе получения антибиотика 7-фаминоцефалоспорановой кислоты из цефалоспорина C. В этом процессе пероксид водорода добавляется в систему для количественного протекания реакции. В белках наиболее подвержены окислению остатки метионина и цистеина. Пероксид водорода является активным окислителем и, благодаря небольшому размеру, способен проникать вглубь белковой глобулы и окислять остатки Cys и Met В нашей лаборатории были получены мутантные формы фермента с заменами цистеина с целью повышения окислительной стабильности TvDAAO. В рамках данной работы было проведено изучение каталитических параметров мутантных TvDAAO в реакции окисления различных D-аминокислот. В результате были получены значения каталитической константы и константы Михаэлиса для мутантных форм TvDAAO, и было проведено сравнение с соответствующими значениями для TvDAAO дикого типа.