ИСТИНА

Эндотелий представляет собой слой уплощенных клеток, выстилающий внутреннюю поверхность сосудов. Эндотелиальный монослой служит полупроницаемым барьером, обеспечивая селективный обмен между кровью и подлежащей соединительной тканью. Монослой эндотелиальных клеток in vitro сохраняет все физиологические свойства, характерные для нативного эндотелия. Широко используемые культуры нормального эндотелия – HUVEC и HPAEC (клетки, полученные из биоптата эндотелия вен пуповины и легочной артерии человека соответственно) – сохраняют эндотелиальную функцию in vitro 10-12 пассажей, реактивы для их культивирования имеют высокую стоимость. Мы использовали клетки гибридной культуры EA.hy926 (гибрид первичных эндотелиальных клеток пуповины с клоном карциномы A549). Клетки EA.hy926, согласно каталогу ATCC, способны претерпевать 100 клеточных делений и сохраняют все свойства, характерные для дифференцированного эндотелия. Для обеспечения основной (барьерной) функции эндотелия особое значение имеют взаимодействия цитоскелетных и адгезивных структур клетки. Известно, что при нарушении эндотелиального барьера в первую очередь наблюдается деполимеризация микротрубочек, а затем изменения актиновой сети клетки. Актиновые структуры являются важнейшим компонентом, обеспечивающим поддержание формы и сокращение эндотелиальной клетки. β- и γ-цитоплазматические изоформы актина локализуются в разных структурах эндотелиоцита. Исследование взаимного расположения немышечных изоформ актина методом двойного иммунофлуоресцентного мечения и микроскопии сверхвысокого разрешения демонстрирует сходство HPAEC и EA.hy926, что подтверждает корреляционный анализ. Обнаруживаемые различия в степени колокализации β- и γ-цитоплазматических изоформ актина обусловлено различным функциональным состоянием отдельных участков ламеллы клетки и взаимодействием с белками-регуляторами и линкерами, обеспечивающими связь с микротрубочками и промежуточными филаментами. Обе линии однотипно реагируют на воздействия, вызывающие барьерную дисфункцию эндотелия. Таким образом, EA.hy926 являются длительно культивируемой адекватной моделью для изучения барьерных свойств эндотелия in vitro, относительно дешевой в использовании.