ИСТИНА

В настоящее время для лечения ВИЧ-инфицированный пациентов успешно применяется высокоактивная антиретровирусная терапия (ВААРТ), направленная на подавление активности основных вирусных ферментов. Несмотря на разнообразие мишеней ВААРТ, проблемой является развитие вирусом резистентности к используемым препаратам. Это происходит из-за неточной работы обратной транскриптазы ВИЧ-1, что приводит к быстрому появлению мутаций, вызывающих устойчивость к применяемым препаратам. Таким образом, актуальным является поиск и изучение новых мишеней для создания препаратов с минимальным риском развития устойчивости. Такими мишенями потенциально могут быть комплексы вирусных белков с клеточными белками, участвующими в репликации вируса. Одним из клеточных белков-партнеров, участвующим в репликации ВИЧ-1, является белок SFPQ (Splicing factor, proline- and glutamine-rich). Он относится к семейству белков DBHS (Drosophila behavior/human splicing) и входит в состав ядерных телец параспеклей. Обладая доменами для взаимодействия с белками и нуклеиновыми кислотами, SFPQ участвует в регуляции сплайсинга, ответе на повреждения ДНК, регуляции транскрипции и других клеточных процессах. Существует ряд работ, в которых показано участие SFPQ в регуляции ранних стадий репликации ВИЧ-1, однако данные достаточно противоречивы, и пути такой регуляции остаются невыясненными. В нашей лаборатории было подтверждено, что SFPQ является положительным фактором обратной транскрипции и интеграции ВИЧ-1. Также известно, что SFPQ образует комплекс с интегразой ВИЧ-1, что может объяснить его участие в репликации вируса на стадии интеграции. Кроме того, известно, что обязательным условием успешной репликации вируса является формирование комплекса между обратной транскриптазой и интегразой. Таким образом, целью настоящей работы было исследовать взаимодействие SFPQ c обратной транскриптазой, а также оценить влияние SFPQ на формирование комплекса обратной транскриптазы и интегразы. С использованием рекомбинантных белков методом соосаждения с последующим анализом Вестерн-блотом мы обнаружили, что SFPQ не взаимодействует с обратной транскриптазой ВИЧ-1. При этом SFPQ препятствует формированию комплекса интегразы с обратной транскриптазой. На основании этих данных можно предположить, что участие SFPQ в обратной транскрипции вируса может осуществляться посредством взаимодействия с интегразой, однако это требует дальнейших исследований. Работа выполнена при поддержке гранта РФФИ № 20-04-00437.