ИСТИНА

Нуклеазы Cas12a типа V являются широко используемыми редакторами ДНК, од- нако поиск новых ферментов, работающих в широком диапазоне температур и исполь- зующих расширенные мотивы, прилегающие к протоспейсеру (PAM), продолжается не- прерывно. Здесь мы демонстрируем новый ортолог из Ruminococcus bromii sp. под названием RbCas12a, который способен эффективно осуществлять направленный гидро- лиз ДНК-матриц, используя 5’-YYN PAM-последовательности в относительно широком диапазоне температур от 20°C до 42°C. По сравнению с Acidaminococcus sp. (AsCas12a), нуклеаза RbCas12a способна более эффективно разрезать ДНК в условиях in vitro. Также мы показываем, что кодон-оптимизированная для человека нуклеаза RbCas12a активна в культуре клеток HEK293T и может применяться для эффективного внесения делеций в геном человека. Учитывая полезные свойства RbCas12a, этот фермент демонстрирует потенциал для использования в клинических и биотехнологических приложениях в об- ласти редактирования генома.