ИСТИНА

Введение. Глутатион, низкомолекулярный тиол - важнейший компонент физиологической антиоксидантной системы. В организме глутатион присутствует в восстановленной (GSH) и окисленной (GSSG) формах. Отношение GSH/GSSG является важной характеристикой, по величине которой можно судить о наличии или отсутствии окислительного стресса в живой системе. Цель. Разработка HPLC-MS-методики измерения скорости окисления глутатиона для последующего изучения влияния внешних физических факторов на данный процесс. Материалы и методы. Окисление восстановленной формы L-глутатиона осуществлялось пероксидом водорода и нитритом натрия при pH=7,4. Концентрация L-глутатиона в реакционной смеси варьировалась от 10-6 до 10-4 моль/л, отношение концентраций L-глутатиона и окислителя варьировалось от 1 до 1000. Эксперименты осуществлялись в условиях, предусматривающих возможность воздействия внешних физических факторов на процесс окисления. Измерения проводились на времяпролетном масс-спектрометре ХЖ-МХ-5310 (ИАП РАН) с жидкостным хроматографом Милихром А-02. Результаты. В ходе работы были определены оптимальные условия распыления окисленной и восстановленной форм глутатиона, получены их масс-спектры в положительных ионах и выбраны характерные значения m/z для GSH, GSSG и других окисленных модификаций глутатиона. Ионы этих m/z были далее использованы для проведения количественных измерений восстановленной и окисленных форм глутатиона, а также для измерения скорости окисления глутатиона, как функции уменьшения его концентрации от времени. Выводы. Таким образом, разработана новая HPLC-MS-методика, позволяющая количественно оценить скорость окисления глутатиона и ее зависимость от воздействия внешних физических факторов.