ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИПМех РАН |
||
Митохондрии эукариотической клетки – это не только поставщики энергии для обеспечения всех внутриклеточных процессов, но и один из основных регулировочных пунктов всей клетки. Митохондрии - единственные органеллы не растительной клетки, которые сохранили собственный геном и трансляционный аппарат для его экспрессии. в основном в митохондриях синтезируются небольшое число высокогидрофобных белков - компонентов цепи окислительного фосфорилирования, которая не только участвует в создании энергии в виде АТФ, но дополнительно производит активные формы кислоро- да (АФК), важнейшие сигнальные агенты клетки. Одним из основных факторов трансля- ции в митохондриях является белок mtIF2, основной функцией которого является фор- мирование инициаторного комплекса на матрице мРНК. Делеция такого фактора должна приводить либо к остановке митохондриальной трансляции, либо к существенному сни- жению ее эффективности. Для установления этого факта мы использовали метод редак- тирования генома с использованием CRISPR-Cas9 системы для внесения в геном делеции, приводящих к возникновению нефункционального белка mtIF2. Анализ продуктов мито- хондриальной трансляции в клетках полученной линии HeLa показал, что делеция гена mtIF2 не приводит не только к остановке трансляции, но и к сколько-нибудь значимому ее снижению. Также отсутствие mtIF2 не вызывает разбалансировки митохондриальной трансляции, как это происходит при делеции третьего фактора митохондриальной транс- ляции mtIF3. Тем не менее, биохимический анализ функции митохондрий в клетках с де- лецией в гене mtIF2 свидетельствует о дисфункции пятого комплекса цепи окислительно- го фосфорилирования в силу сниженного уровня дыхания, связанного с производством АТФ. все это указывает на то, что mtIF2 не является обязательным фактором митохон- дриальной трансляцииф и может выполнять ряд альтернативных функций, связанных со сборкой и функционирование комплексов цепи окислительного фосфорилирования.