ИСТИНА

Сахарный диабет (СД) в настоящее время имеет все признаки заболевания с эпидемиологическим характером распространения, и по прогнозам к 2045 году число больных диабетом увеличится до 629 млн. Гипергликемия является главным признаком сахарного диабета всех типов и одним из основных его патологических факторов. Повышенный уровень глюкозы существенно ухудшает прогноз исхода острого ишемического инсульта. В структуре летальности у больных СД основное место занимают инфаркт миокарда (55%) и инсульт (29%). Повышенный уровень глюкозы способствует развитию атеросклероза, тромбообразованию, эндотелиальной дисфункции и системного воспалительного ответа. Цель данной работы – изучение влияния гипергликемии на выраженность повреждения ткани мозга при ишемии у мышей и на провоспалительную реактивность астроцитов мыши в культуре. Исследования проведены на самцах мышей линии C57BL/6J и первичной культуре астроцитов, выделенных из кортекса новорожденных мышей. СД индуцировали введением стрептозотоцина в дозе 55 мг/кг в течение 5 дней. Ишемия головного мозга была индуцирована методом фототромбоза сенсомоторной зоны коры левого полушария (доза бенгальского розового – 10 мг/кг, параметры лазерной установки: λ=532 нм, освещенность – 55-60 лк). Размеры очага оценивали по окрашиванию мозга 1% раствором хлорида трифенилтетразолия (ТТС). Детекцию проницаемости гемато-энцефалического барьера (ГЭБ) осуществляли с помощью витального красителя Эванса синего (80 мг/кг). Уровень моторного дефицита животных определяли с помощью сенсомоторного теста «Решетка». В культуре астроцитов моделировали условия нормогликемии (5,5 мМ глюкозы) и гипергликемии (25 мМ глюкозы), контроль – группа без сыворотки FBS. При различном содержании глюкозы вносили в среды 10-100 нМ тромбина и ЛПС в двух различных концентрациях (100 нг/мл и 1 мкг/мл). Через 48 часов оценивали секрецию NO с помощью реагента Грисса и изменения цитоскелета окрашиванием фаллоидином Alexa Fluor 488 и 555. Высвобождение NO астроцитами в присутствии ЛПС при 25 мМ глюкозы было ниже (не отличалось от контроля), чем при нормогликемии, где данный показатель был в 1,8 раза выше, чем в контроле. Под действием тромбина происходит перестройка актинового цитоскелета в астроцитах в условиях нормогликемии (5,5 мМ глюкозы). Гипергликемия (25 мМ глюкозы) снижает вызванную тромбином перестройку актина. Измерение уровня глюкозы в крови у животных из группы «стрептозотоцин-вызванный диабет» (СД) подтвердило развитие диабета у всех животных данной группы (>16 мМоль/л на 10-й день). Фототромбоз (ФТ) сенсомоторной зоны КБП приводил к развитию ишемического очага размером 4,5+1,5 мм3 у животных без СД (группа «Ф»). Диабет усугублял вызванное ишемией повреждение мозга, увеличивая размер очага в 1,7 раз у группы «Ф+Д» по сравнению с группой животных без СД. Анализ барьерной функции ГЭБ показал, что ФТ приводит к значимому повышению проницаемости ГЭБ в поврежденном полушарии по сравнению с контралатеральным через 24 часа после ФТ. Анализ теста «Решетка» показал, что ишемия приводит более чем к 3-ехкратному возрастанию числа моторных ошибок, сделанных контралатеральной поврежденному полушарию конечностью. Количество моторных ошибок в группе с ФТ, осложненным СД, было в 1,4 раза выше, чем в группе только с ФТ. Таким образом, гипергликемия потенцирует повреждение ткани мозга, вызванное фотоиндуцированной ишемией, и выступает самостоятельным провоспалительным фактором для астроцитов, маскируя их ответ на тромбин и липополисахарид.