ИСТИНА

Протеасома играет ключевую роль в регуляции уровня специфических белков, поддерживая гомеостаз внутри клеток. Она катализирует деградацию белков, участвующих в управлении жизненным циклом клеток, регулируя их концентрации, а также избирательно уничтожает потенциально вредоносные аномальные или денатурированных белки, образующиеся при различных патологических процессах. Кроме того, протеасома участвует в процессах, связанных с работой иммунной системы, а именно в деградации белков с образованием антигенных пептидов, которые затем презентируются на молекулах МНС. В организме животных содержится два типа протеасомы – стандартная и иммунопротеасома. Под действием провоспалительных цитокинов в клетках начинается биосинтез каталитических иммуносубъединиц. Они обладают другой субстратной специфичностью, встраиваясь во вновь собирающиеся частицы протеасомы вместо конститутивных субъединиц. Для регуляции активности протеасомы разработаны ингибиторы нескольких классов. Среди них пептидоборонаты, в том числе бортезомиб, являются сильными ингибиторами, с Ki около нескольких нмоль. Однако эти вещества действуют как на конститутивную, так и на иммунопротеасому, на любые клетки, что приводит к остановке протеолиза и к смерти клеток через апоптоз. Предполагается, что пептидилэпоксикетоны, другой класс ингибиторов, обладают большей селективностью к иммунопротеасоме. Активность протеасомы, выделенной из различных источников (эукариотические клетки линий CHO и NSO, обработанные и не обработанные гамма-интерфероном, и мозг мышей линий BALB/c и SJL) была изучена в присутствии ряда ингибиторов. Использованы ингибиторы четырех классов, а именно пептидоборонат бортезомиб, пептидоальдегид MG132, лактамный ингибитор лактацистин, а также пептидилэпоксикетоны эпоксомицин, MG132ek, LMP2- и LMP7-специфические ингибиторы. Были получены значения IC50 для всех перечисленных ингибиторов и в некоторых случаях рассчитаны Ki. Показано, что эпоксикетоны в субмикромолярных концентрациях селективно ингибируют образцы протеасомы с высоким содержанием иммуносубъединиц. Это создает предпосылки для возможного использования ингибиторов данного класса в качестве лекарств направленного действия. Работа выполнена при финансовой поддержке гранта РФФИ 09-04-01546.