ИСТИНА

Гаструляция является одним из основных этапов развития всех живых существ, у которых есть по крайней мере два зародышевых листка. Это сложный процесс морфогенетических перестроек, сопровождающийся пролиферацией, дифференцировкой и непосредственным перемещением клеток. Достаточно хорошо известны молекулярно-генетические каскады, обеспечивающие скоординированные морфогенетические движения в процессе гаструляции. Однако влияние древних сигнальных молекул, таких как моноамины, на активность биохимических регуляторных каскадов, изучено недостаточно. Традиционно считается, что моноамины действуют лишь как активаторы мембранных рецепторов. Значение накопления серотонина внутри клетки и его влияние на морфогенез не показано. Целью нашей работы было подробное описание клеточных движений во время гаструляции брюхоного моллюска Lymnaea stagnalis в нормальных условиях и при высоком внутриклеточном уровне серотонина. В своей работе мы использовали ранее отработанную модель повышения уровня внутриклеточного серотонина, приводящую к возникновению необратимых мальформаций на стадии гаструлы. Эмбрионы инкубировали в 1 мМ непосредственном предшественнике серотонина (5-HTP) в течение 24 часов после оплодотворения. Повышение внутриклеточного уровня 5-HT контролировали маркированием зародыша антителами к серотонину. Форму и положение клеток определяли с помощью окрашивания фаллоидином границ клеток и ядер. Результаты анализировали с помощью конфокальной микроскопии с 3D- реконструкцией. Инкубация в 5-HTР приводила к увеличению уровня серотонина во всех клетках зародыша Lymnaea на ранних стадиях развития. В таких условиях мы наблюдали изменение количества контактов между идентифицированными бластомерами, высокие вариации размера и формы бластомеров, задержку скорости пролиферации. Было отмечено также отсутствие актин-зависимого сокращения апикальных полюсов клеток вегетативной поверхности эмбриона, в месте, где в норме формируется бластопор. Мы предполагаем, что описанные изменения приводят к аномальным движениям клеток и/или клеточных слоев во время гаструляции, что приводит к возникновению мальформаций и последующему образованию экзогаструлы. Привлечение методов электронной микроскопии для дальнейших исследований позволит подтвердить наши предположения.