ИСТИНА

Пандемия короновируса 2020-2023 года показала незащищенность человечества перед патогенами. Кроме основного ущерба здравоохранению, нанесенного пандемией, отмечается так же и существенный рост резистентности бактерий к используемым лекарственным препаратам. Таким образом задача поиска новых антибиотиков остро стоит перед современной наукой. В нашей лаборатории была разработана репортреная система позволяющая высокопроизводительно сортировать антибиотики по механизму действия. Репортерная система работает по следующему принципу (рис.1): если соединение ингибирует синтез белка в клетке, это приводит к синтезу дальнекрасного флуоресцентного белка (Katushka2S). ДНК повреждающие соединения активируют SOS-ответ в клетке, что приводит к запуску экспрессии гена красного флуоресцентного белка (TurboRFP). Для поиска новых антибиотиков были использованы гиперчувствительные к антибиотикам штаммы E. coli JW5503 с удаленным геном эффлюксной помпы tolC (ΔtolC) и E. coli с мутацией в гене отвечающим за синтез липополисахарида lptD (lptDmut) трансформированные репортерной плазмидой pDualrep2. В нашей лаборатории был произведен масштабный поиск веществ с антибиотической активностью при помощи репортерной системы pDualrep2. Было проверено более 60000 индивидуальных химических соединений из химических библиотек. В результате была обнаружена молекула, индуцирующая трансляционную часть репортерной системы и ингибирующая биосинтез белка. В ходе скрининга природных объектов были найдены продуценты таких антибиотиков как аурапланин, тетраценомицин Х, алтиомицин, нибомицин и других. Далее были подобраны условия выделения этих антибиотиков и описан их молекулярный механизм действия. Таким образом данная система показала свою эффективность как инструмент поиска новых соединений с антибиотической активностью и уточнения механизма действия уже известных соединений. Данное исследование было профинансировано Министерством науки и высшего образования Российской Федерации (соглашение No 075-15-2021-1085).