ИСТИНА

В работе исследовали шаперонин бактериофага AR9 B. subtilis, кодируемый геном 228. Рекомбинантный белок представляет собой кольцо из семи субъединиц, шесть из которых объединяются в пары (в каждой паре субъединицы находятся в двух определенных конформационных состояниях); оставшаяся же субъединица обладает повышенной лабильностью. Поскольку функционирование шаперонина AR9 является АТФ-зависимым, целью работы было получение криоЭМ структуры его комплекса с АТФ. Образец был витрифицирован в жидком этане в роботе Vitrobot Mark IV. Полученные с использованием криогенного электронного микроскопа Titan Krios (РЦ Нанозонд, НИЦ «Курчатовский институт») изображения были обработаны в программном пакете CryoSPARC. После предварительной обработки была получена карта электронной плотности комплекса шаперонина с АТФ с разрешением 3.2 Å. C использованием утилит CryoSPARC разрешение было улучшено до 2.5 Å, что значительно выше, чем для ранее опубликованной нами структуры его апо формы. На карте электронной плотности четко визуализируются как пары объединённых субъединиц, так и непарная субъединица, которая за счет своей подвижности разрешена хуже остальных субъединиц. Экваториальные домены имеют жёсткую структуру и разрешены лучше апикальных. Ведется работа по дальнейшему улучшению карты плотности и изучению отличий строения апо формы субъединиц и шаперонина в целом от его комплекса с АТФ.