ИСТИНА

Известно, что наиболее чувствительным форматом иммуноферментного анализа является анализ с хемилюминесцентной детекцией. В этом случае кванты света формируются в процессе ферментативного окисления люминола пероксидом водорода, катализируемого пероксидазой, которая применяется как молекула-метка антител или антигенов. Так как пероксидазы растений не являются суперактивными катализаторами в реакции окисления люминола, для повышения их активности в субстратную смесь добавляются вещества, которые называются усилителями. В течение длительного времени наиболее эффективным усилителем являлся п-иодофенол. В нашей работе мы показали, что производные фенотиазинов, несущие отрицательно заряженные группы, являются активными усилителями пероксидаза-зависимой хемилюминесценции, в то время как фенотиазины с положительно заряженными группами таковыми не являются. Показано, что 3-(10’-фенотиазинил)пропан-1-сульфат (ФТПС) [1] и 3-(10’-фенотиа-зинил)пропионовая кислота (ФТПК) [1,2] повышают хемилюминесцентный сигнал значительно сильнее, чем п-иодофенол. Особенностью фенотиазиновых усилителей является то, что эти вещества повышают свою активность в присутствии некоторых производных пиридина (вторичные усилители). Наиболее активным из вторичных усилителей является N-морфолинопиридин (МП). Механизм действия МП был нами предложен [3]. Условия проведения реакции усиленной хемилюминесценции при использовании ФТПС/ФТПК в комбинации с МП были оптимизированы. При найденных условиях интенсивность свечения практически не меняется в течение длительного периода времени. Детектируюшие системы ФТПС/ФТПК-МП были успешно применены при разработки высокочувствительных иммуноферментных тест-систем для определения 2,4-Д [4], афлатоксинов В1 и М1 [5], тироглобулина человека [6] и метилглиоксадили-рованного липопротеида низкой плотности [2]. Полученные результаты открывают широкие перспективы для использования фенотиазиновых усилителей в аналитической практике.