ИСТИНА

Биогенные амины — это органические соединения, образующиеся в живых организмах и участвующие в различных биологических процессах. Они включают соединения с первичной аминогруппой (такие как серотонин, гистамин, путресцин и т.д.) и со вторичной аминогруппой (такие как спермин, спермидин и т.д.). Биогенные амины выполняют множество биологических функций и могут являться нейромедиаторами, гормонами и модуляторами физиологических процессов. Детекция биогенных аминов имеет большое значение в различных областях биотехнологии. В медицине, уровень этих соединений может быть использован в качестве диагностического инструмента для выявления различных заболеваний, включая опухоли и неврологические расстройства. В пищевой промышленности, контроль уровня биогенных аминов в продуктах питания важен для обеспечения их безопасности и качества. Для детекции биогенных аминов в основном используют хроматографические методы. Технически простой и недорогой альтернативой является детекция с использованием ферментов. Основным ограничением данного подхода является необходимость проведения сложных поисковых исследований с целью поиска подходящего фермента под каждую конкретную методику. FAD-зависимая полиаминоксидаза (PAO, EC 1.5.3.17) катализирует окисление биогенных аминов по вторичным аминогруппам. Наиболее важными субстратами большинства PAO являются спермин, спермидин и их ацильные производных. Медь-зависимая аминооксидаза (CuAO, EC 1.4.3.21 и EC 1.4.3.22) катализирует окисление биогенных аминов по первичной аминогруппе. Наиболее важными субстратами CuAO являются гистамин, путресцин и кадаверин. В данной работе были клонированы и охарактеризованы новые FAD-зависимая полиаминоксидаза и медь-зависимая аминооксидаза. Ферменты были экспрессированны в клетках E.coli и получены в высокоочищенном виде. Для данных ферментов изучены зависимости активности и стабильности от температуры и от pH, определены каталитические параметры с основными субстратами. Исследованные ферменты обладают хорошими кинетическими характеристиками, что делает их перспективными для применения в биотехнологии для детекции биогенных аминов.