ИСТИНА

Для получения РФП комплекс с радионуклидом конъюгируют с биологической молекулой, обеспечивающей доставку к раковым клеткам. Одним из перспективных радионуклидов для терапии альфа-излучением является 213Bi (T1/2=46 мин). Чаще всего используют хелаторы DOTA и DTPA, но комплекс с DTPA неустойчив in vivo, а DOTA медленно связывает катион (до 1 ч), либо требует повышенных температур (до 100°С). L Целями данной работы были: поиск условий очистки комплекса BiL от несвязанного с лигандом металла и определение устойчивости комплекса BiL (L –азакраун-эфир) в средах биологического значения с помощью тонкослойной хроматографии (ТСХ). Содержание Bi3+ в растворах и на пластинах ТСХ контролировали методом гамма-спектрометрии 207Bi (T1/2=31,5лет) по линии E=570кэВ, а также методом авторадиографии. Поскольку необходимо исключить присутствие несвязанных в комплекс с лигандом форм висмута в растворе, были разработаны методики очистки BiL методом ВЭЖХ с градиентным режимом элюирования (элюент - вода-метанол) и колоночной хроматографии на силикагеле (элюент - 0,1 M MES, pH=6). Для ТСХ опробовали ряд элюентов и хроматографических пластин с хелатором DOTA (табл.1). Таблица 1. Результаты ТСХ для Bi, BiL в разных системах: пластина/элюент. ТСХ пластина Элюент SiO2 Целлюлоза Bi-blank Bi-DOTA Bi-blank Bi-DOTA 9% NaCl/0,01 M NaOH Rf=0 Rf=0,1-0,3 Rf=0 Rf=0,9 Py:H2O:C2H5OH (1:4:2) Rf=0 Rf=0,7-1 Rf=0,3 Rf=0,6-1 CH3CN:H2O:NH4OH (1:2:1) Rf=0 Rf=0,8-1 Rf=0 Rf=0,8-1 Лучшие результаты показала система: целлюлоза на Al подложке, элюент - 9% NaCl/0,01 M NaOH. В этих условиях, методом ТСХ, определили степень мечения L при разных концентрациях. Количество BiL определяли измерением радиоактивности соответствующих участков пластины методом гамма-спектрометрии. Наиболее полное мечение лиганда достигается при концентрациях лиганда 7-10∙10-4М. Таблица 2. Степень мечения лиганда в зависимости от его концентрации. c(L), M 1∙10-5 1∙10-4 3∙10-4 7∙10-4 1∙10-3 % BiL 3±2 90±3 97,3±0,4 98,5±0,1 98,6±0,1 Раствор чистого комплекса BiL использовали для оценки устойчивости BiL в изотоническом растворе и бычьей сыворотке методом ТСХ на целлюлозной пластинке с Al подложкой, подвижная фаза: 9% NaCl/0,01 M NaOH. Контрольные точки снимались через 0, 15, 30, 60 мин, 1, 2, 5 сут. По результатам ТСХ, в течение пяти дней не наблюдается перехелатирования комплекса в изотоническом растворе и сыворотке. Работа выполнена при финансовой поддержке гранта РФФИ №16-33-00642 и РНФ №16-13-10226.