ИСТИНА

Центросома является обязательной органеллой животной клетки и выступает в качестве центра нуклеации и организации микротрубочек в интерфазе и митозе. Помимо этого, в специализированных клетках животных и человека центросома выполняет ряд специфических функций. В частности, центросома играет важную роль в обеспечении жизнедеятельности эндотелиальной клетки. Монослой эндотелиоцитов, выстилающий внутреннюю поверхность кровеносных сосудов, служит полупроницаемым селективным барьером для различных макромолекул и форменных элементов крови. Значительный вклад в обеспечение барьерной функции эндотелия вносит цитоскелет, в том числе система цитоплазматических микротрубочек. На модели эндотелиального монослоя in vitro мы показали, что центросома располагается преимущественно в геометрическом центре эндотелиоцитов и организует микротрубочки в радиальную систему, т.е. в эндотелиальных клетках большая часть микротрубочек заякорена на центросоме, а число свободных микротрубочек невелико. Система микротрубочек активно вовлечена в реакцию эндотелиальных клеток на повреждающие воздействия химическими агентами (тромбином, нокодазолом и др.), причем деполимеризация периферических микротрубочек является начальным звеном в развитии барьерной дисфункции. Последующее развитие барьерной дисфункции связано с образованием актиновых стресс-фибрилл и сжатием эндотелиальной клетки, приводящее к нарушению межклеточных контактов и образованию дефектов в эндотелиальном монослое. Исследования поведения эндотелия in vitro позволили показать, что центросома эндотелиальных клеток способна быстро реагировать на внешние воздействия, отвечая выраженными морфологическими изменениями. В ходе работы был проведен анализ активности центросомы в живых эндотелиальных клетках, результаты которого, возможно, являются одним из свидетельств значительной вовлеченности центросомы в функциональную активность эндотелиальных клеток. Центросома может влиять на количество динамичных концов микротрубочек в районе межклеточных контактов. Для исследования динамики микротрубочек использовали эндотелиальный монослой легочной артерии человека (НРАЕС). Динамику микротрубочек исследовали в живых клетках, экспрессирующих плюс-концевой белок микротрубочек EB3, слитый с GFP. Анализировали среднюю скорость роста плюс-конца для двух типов микротрубочек – тангенциальных (растущих вдоль зоны межклеточных контактов) и радиальных (растущих от центросомы и ориентированных в область межклеточных контактов). Оказалось, что скорость роста плюс-концов радиальных микротрубочек (18,00±0,69 мкм/мин) превышает скорость роста плюс-концов тангенциальных микротрубочек (16,84±0,79 мкм/мин) как для одиночных клеток, так и для клеток, имеющих соседей (9,09±0,43 мкм/мин и 7,63±0,37 мкм/мин соответственно). Общее количество микротрубочек, радиально растущих от центросомы, превышает количество тангенциальных микротрубочек в обеих анализируемых группах, при этом в клетках, окруженных соседними, радиальных микротрубочек больше, чем в одиночных клетках. Полученные данные свидетельствуют о различиях в одиночных клетках и в клетках, контактирующих с соседними. Таким образом, центросома способна влиять на количество микротрубочек в районе межклеточных контактов, а поскольку динамичные концы микротрубочек взаимодействуют с межклеточными контактами, центросома тем самым вовлечена, в регуляцию барьерной функции эндотелия. Поддержано РФФИ (#15-04-08550) и Программой развития МГУ (PNR 5.13).