ИСТИНА

В основе большинства биоаналитических методов лежит реакция взаимодействия антигена и антитела, где в качестве сенсорных компонентов используются радиоактивные изотопы, ферменты, флуоресцентные красители, наночастицы и т.д., что позволило разработать огромное число электрохимических, колориметрических, флуоресцентных и хемилюминесцентных методов анализа. Однако в последние годы большое внимание исследователей было обращено на использовании олигонуклеотидов в аналитической практике. Наиболее широкое применение эти вещества получили в методах определения нуклеиновых кислот, основанных на реакции гибридизации комплементарных одноцепочечных молекул. Так как на практике требуется определять нуклеиновые кислоты в чрезвычайно низких концентрациях, разработанные методы сочетают с различными амплификационными методами, характерными для ДНК и РНК. Чаще других для этих целей используют ПЦР. Однако из-за того, что ПЦР требует дорогостоящего оборудования и варьирование температуры в процессе его исполнения, в настоящее время активно развиваются как ферментативные, так и неферментативные изотермические методы амплификации нуклеиновых кислот. Использование последних позволяет значительно повысить чувствительность методов анализа ДНК и РНК. Следует заметить, что дуплексы ДНК могут образовываться не только за счет комплементарного взаимодействия молекул нуклеиновых кислот, но и в результате образования таких химических связей как Т-Hg+2-T и C-Ag+-C. Это послужило основой для развития разнообразных модификаций чувствительных методов определения катионов ртути и серебра. Олигонуклеотид-специфические методы могут основываться не только на реакции гибридизации, но и на взаимодействии аптамеров с различными веществами. В данном случае аптамеры можно рассматривать как сенсорные заместители антител в иммунохимических методах анализа, но обладающие следующими преимуществами: (а) более высокая стабильность, (б) возможность быстро и просто реактивировать сенсорную молекулу, (в) синтетический метод получения, (г) структурная идентичность сенсорной молекулы. Наличие аптамеров, специфически связывающихся и с низкомолекулярными соединениями, и с белками, и клетками, позволило биоаналитикам разработать методы для определения указанных аналитов. Олигонуклеотиды могут выполнять не только роль сенсорного компонента, но и также роль детектирующего компонента. Так, в аналитической практике используется ДНКзимы, состоящие из олигонуклеотидов в комплексе с катионами свинца или гемином. Эти ДНКзимы, обладающие каталитической активностью нуклеазы и пероксидазы, позволили разработать чувствительные гомогенные методы анализа различных соединений. Таким образом, применение олигонуклеотидов открывает широкие перспективы для создания как новых оригинальных методов, так и улучшения уже известных аналитических методов, при этом аналитами могут служит вещества любой химической природы.