ИСТИНА

Молекулярный импринтинг – один из распространенных способов получения полимерных матриц с полостями (отпечатками) для селективного связывания целевых молекул (темплатов). Однако для подобных матриц характерно образование достаточно большого числа неэффективных сайтов распознавания, расположенных в массе полимера, что затрудняет массоперенос к ним молекул аналита. Возможным решением данной проблемы является синтез молекулярно- импринтированных полимеров (МИП) в виде тонких пленок на поверхности носителей (например, силикагеля). В данной работе были получены молекулярно-импринтированные белки, ковалентно (с помощью карбодиимидной сшивки) или нековалентно (в присутствии полиэлектролитов: полиэтиленимина и полиаллиламина) иммобилизованные на поверхности кремнеземов с привитыми иминодиацетатными и 2-карбоксиэтил группами для сорбционного концентрирования органических темплатов (метиленового синего, бромтимолового синего и гидрохинона). Ковалентно иммобилизованный бычий сывороточный альбумин или нековалентно иммобилизованный его полиэлектролитный комплекс в присутствии темплата сшивали глутаровым альдегидом до или после иммобилизации. Оптимизацию условий сшивки глутаровым альдегидом проводили варьируя концентрации глутарового альдегида, полиэлектролита и белка, а также величину pH среды. Критериями выбора служили максимальный импринтинг-фактор и сорбционная емкость, для определения которых проводили повторное связывание темплатов на отмытых и высушенных образцах. Кинетика сорбции большинства образцов подчиняется модели псевдо-второго порядка, при этом у сшитых образцов константа скорости на 1-2 порядка выше, чем у несшитых. Ожидалось, что будут выявлены системы (носитель – биополимер – темплат или носитель – биополимер – темплат – полиэлектролит), в которых будет наблюдаться молекулярный импринтинг (т.е. импринтинг-фактор будет выше единицы). Однако импринтинг фактор достиг 1.5-1.8 только в случае ковалентной иммобилизации белка (бычьего сывороточного альбумина) с последующей сшивкой глутаровым альдегидом в присутствии в качестве темплатов метиленового синего и гидрохинона; и 7.3 в случае нековалентной иммобилизации комплекса белок-полиаллиламин в присутствии бромтимолового синего. Однако в последнем случае степень извлечения была низкой (до 20%), а высокий импринтинг фактор после повторной отмывки не воспроизвелся. Некоторые из полученных сорбентов имели более высокую селективность и/или показали более высокую степень связывания темплата, чем существующие молекулярно-импринтированные сорбенты на основе неорганических полимеров. Так, сорбционная емкость ковалентно иммобилизованных молекулярно-импринтированных белков достигала 600.5 мкг/г метиленового синего и 37.9 мкг/г гидрохинона, а нековалентно иммобилизованных – 1 мг/г бромтимолового синего. Молекулярно-импринтированный белок, нековалентно иммобилизованный в присутствии полиаллиламина более селективно извлекает бромтимоловый синий, по сравнению с бромкрезоловым пурпурным, бромфеноловым красным и крезоловым красным.