ИСТИНА

Теломераза – это фермент, участвующий в поддержании стабильности генома, синтезируя повторяющиеся теломерные ДНК последовательности на концах хромосом эукариот. Теломеразная активность детектируется в стволовых, половых и зародышевых клетках, а также в одноклеточных эукариотах, таких как дрожжи, однако в норме отсутствует в большинстве соматических клеток. Активация теломеразы обеспечивает неограниченное деление клеток в 80% типов раковых образований. Структурная характеристика теломеразы и ее компонентов необходима для направленного дизайна потенциальных антираковых препаратов. Основными компонентами теломеразного комплекса являются каталитическая субъединица – теломеразная обратная транскриптаза (TERT) и теломеразная РНК (TR). В последовательность TERT входят N-концевой, РНК-связывающий, каталитический и С-концевой домены. Теломеразная РНК включает в себя матричный участок, комплементарный последовательности теломерного повтора, псевдоузел, элементы TWJ и TBE и Est1-связывающую шпильку. Изучению теломеразы препятствует весьма низкая стабильность её компонентов. В ходе данной работы экспрессией в E. coli был получен стабильный белок, соответствующий hpTERT без N-концевого участка, однако содержащий все остальные домены. Были подобраны условия получения комплекса hpTERT с ДНК-РНК гетеродуплексом, имитирующим субстрат теломеразы. Полученный комплекс, моделирующий минимальный структурный кор теломеразы, был использован для начального скрининга условий кристаллизации.