ИСТИНА

В результате "впрыскивания" электрона в цитохромоксидазу с помощью короткого импульса лазерного света наблюдается многокомпонентая кинетика генерации мембранного потенциала. Образующийся набор электрогенных компонент зависит от исходного состояния оксидазы и включает в себя перенос электрона в двухядерный центр и стадии сопряженного протонного транспорта. Стадия переноса на кислорода 4-ого электрона в каталитическом цикле цитохромоксидазы содержит 3 фазы векторного движения зарядов: "быструю", "среднюю" и "медленную". В "быстрой" фазе электрон переносится с CuA на гем а. В ходе "средней" и "медленной" фаз энергия реокисления гема а двухядерным центром расходуется на направленный транспорт протонов через мембрану. Мутация N139D цитохромоксидазы из R.sphaeroides полностью сохраняет стационарную активность, приводя при этом к утрате трансмембранного переноса протонов. Наблюдающаяся в диком типе "средняя" электрогенная фаза утрачивается в мутанте N139D и, вероятно, связана с транслокацией протона на внешнюю сторону мембраны. "Медленная" электрогенная фаза в диком типе и мутанте N139D отражает транспорт "химического" протона из внутренней водной фазы к остатку E286 и далее к гем а3/CuB центру. Существенно, что в цитохромоксидазе дикого типа электрогенная реакция переноса протона на внешнюю сторону мембраны, предшествует протонной фазе, связанной с химией восстановления кислорода.