Описание:Программа курса для аспирантов:
1. Гомогенизация. Способы гомогенизации. Типы гомогенизаторов. Требования к средам для гомогенизации.
2. Основные понятия теории центрифугирования. Параметры, влияющие на скорость седиментации. Плавучая плотность. Коэффициент и константа седиментации. Классификация методов центрифугирования. Выбор роторов для проведения центрифугирования.
3. Скоростная седиментация. Дифференциальное и зональное скоростное центрифугирование. Использование скоростной седиментации в аналитических и препаративных целях. Выбор и способы приготовления градиентов для зонального центрифугирования.
4. Изопикническое центрифугирование. Принцип метода. Преформированные и непреформированные градиенты. Выбор градиентов для изопикнического центрифугирования. Способы формирования градиентов.
5. Применение экстракции для выделения и очистки низкомолекулярных и высокомолекулярных соединений. Двух- и многофазные системы водорастворимых полимеров и их использование для очистки высокомолекулярных веществ.
6. Способы перевода в водорастворимое состояние периферических и интегральных мембранных белков. Солюбилизация. Принцип метода. Основные виды детергентов и их свойства.
7. Высаливание и рН-фракционирование белков. Принципы методов, их возможности и ограничения.
8. Основной принцип хроматографии. Классификация хроматографических методов по принципам процесса разделения и по способам хроматографии.
9. Элементы теории хроматографии. Основные параметры хроматографии. Хроматографическое разрешение. Оптимизация хроматографического процесса.
10. Понятие о теоретической тарелке. Способы увеличения числа теоретических тарелок хроматографической системы. Особенности высокоэффективной жидкостной хроматографии.
11. Адсорбционная хроматография. Принцип разделения веществ. Выбор подвижной и неподвижной фазы. Распределительная хроматография. Выбор подвижной фазы.
12. Хроматография в обращенных фазах. Принцип метода. Основные виды сорбентов. Оптимизация метода. Особенности хроматографии белков на обратнофазных сорбентах.
13. Ионообменная хроматография. Принцип метода. Основные виды сорбентов. Выбор условий хроматографии
14. Гель-фильтрация. Принцип метода. Области применения гель-фильтрации и хроматографических сред, используемых для гель-фильтрации.
15. Аффинная хроматография. Принцип метода. Условия, предъявляемые к неподвижным фазам и способы их приготовления. . Этапы аффинной хроматографии.
16. Влияние условий сорбции и десорбции разделяемых веществ на разрешение при аффинной хроматографии. Групп-специфичная аффинная хроматография, ион-парная хроматография, ковалентная хроматография.
17. Принципы электрофоретических методов. Параметры, влияющие на разделение частиц в электрическом поле. Гель-электрофорез. Среды для гель-электрофореза и способы их получения. Принцип диск-электрофореза.
18. График Фергюссона. Электрофорез в полиакриламидном геле в нативных условиях и в присутствии додецилсульфата натрия. Принцип и возможности метода. Электрофорез в импульсных электрических полях.
19. Понятие об электроэндоосмосе. Капиллярный электрофорез и его варианты – капиллярный зональный электрофорез, мицеллярная электрокинетическая хроматография.
20. Изотахофорез. Изоэлектрическое фокусирование. Принципы и возможности методов. Свойства амфолитов. Двумерный ИЭФ-ЭФ.