|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИПМех РАН |
||
Идентификация генов транспорта сидерофоров у цианобактерии Synechocystis sp. PCC 6803дипломная работа (Магистр)
- Научные руководители: Бабыкин М.М., Обандо Т.
- Автор: Биканов Роман Андреевич
- Тип: Магистр
- Организация, в которой проходила защита: МГУ имени М.В. Ломоносова
- Год защиты: 2015
- Аннотация: С использованием модифицированной среды с избытком железа сегрегированы гомозиготные мутанты DfutC и DfutC/DtonB с нарушенным транспортом свободных ионов железа у цианобактерии Synechocystis sp. PCC 6803. С помощью направленного инсерционного мутагенеза сконструированы мутанты с инактивированными генами fecB1, fecB2, fecB3, fecC, fecD, fecE, fhuA1, fhuA2 и fhuA3 предполагаемых систем транспорта сидерофоров. Проведено сравнительное изучение характера роста мутантов DfutC и DfutC/DtonB, а также девяти мутантов Dfec- и DfhuA- в зависимости от наличия в среде в качестве единственного источника железа определенного сидерофора (из шести тестированных), либо железосодержащего белка, трансферрина или лактоферрина. Проведенное исследование показало следующее. 1. Цианобактерия Synechocystis 6803 способна использовать сидерофор шизокинин в качестве единственного источника железа в среде. При этом транспорт шизокинина в клетку зависит от гена tonB, контролирующего у грамотрицательных бактерий сопряжение переноса веществ через наружную мембрану с электрохимическим потенциалом цитоплазматической мембраны. 2. Сидерофоры аэробактин, ферриоксамин B, феррихром и энтеробактин, а также белки лактоферрин и трансферрин не служат источниками железа для Synechocystis 6803. 3. Инактивация гена tonB приводит к усвоению клетками мутанта DfutC/DtonB свободного железа, сидерофора энтеробактина и белка трансферрина, которое не наблюдается у одиночного мутанта DfutC. Данный факт указывает на наличие у Synechocystis 6803 неизвестного пути транспорта железа, независимого от генов futC и tonB и проявляющегося при нарушении функции гена tonB. 4. Инактивация генов fecB1 и fecE, кодирующих компоненты предполагаемой транспортной системы, локализованной в периплазме и внутренней мембране, приводит к полному нарушению способности клеток Synechocystis 6803 усваивать в качестве единственных источников железа шизокинин и сидерофор нитчатой цианобактерии Anabaena variabilis. Следовательно, tonB-зависимое поглощение этих сидерофоров осуществляется посредством одного общего пути транспорта, контролируемого генами fecB1 и fecE.
- Добавил в систему: Бабыкин Михаил Михайлович