Определение физиологически активных веществ методами спектроскопии Рэлеевского рассеяния и молекулярной люминесценции с применением наночастицдипломная работа (Специалист)
Аннотация:1. Разработана методика получения наночастиц серебра (НЧС), стабилизированных поверхностно-активными веществами (ДДС и ЦТАБ), для дальнейшего применения их в методах рэлеевского рассеянного света (РРС) и спектрофлуориметрии (ФЛ). Выбрана литературная методика получения НЧС, стабилизированных цитратом натрия. Полученные НЧС охарактеризованы методами спектрофотометрии, флуориметрии, просвечивающей электронной микроскопии и динамического светорассеяния. Установлено, что все типы НЧС обладают флуоресценцией (λex=190 нм, λem=485 и 520 нм).
2. Сигналы резонансного РРС и ФЛ всех трех типов НЧС возрастают в присутствии кверцетина и ионов серебра. Выбраны условия (концентрации, время, температура, pH) определения кверцетина с помощью НЧС. Диапазоны определяемых концентраций для PPC и ФЛ определения: (0.1-2.0)×10–6 М для НЧС-ЦТАБ, (0.1-1.3)×10–6 М для НЧС-ДДС и НЧС-цитрат. Пределы обнаружения для РРС определения – 3×10–8 М, 2×10–8 М, 1×10–8 М и для ФЛ-определения – 6×10–8 М, 4×10–8 М, 3×10–8 М для НЧС-ЦТАБ, НЧС-цитрат, НЧС-ДДС, соответственно. Для 1.5×10–6 М кверцетина повторяемость (sr) 7%, прецизионность (sR) 10% (n=4, P=0.95). Правильность определения кверцетина в водном растворе проверена методом «введено-найдено».
3. Исследовано мешающее влияние некоторых органических соединений (цистеин, аспарагин, мочевая кислота, мочевина, альбумин), хлорид-иона и ионной силы раствора для систем, содержащих различные типы НЧС. Показано, что НЧС-Цитрат наименее устойчивы к хлорид-ионам, чем системы НЧС-ЦТАБ и НЧС-ДДС, а НЧС-ДДС наименее устойчивы к воздействию ионной силы. Для всех типов НЧС наибольшее мешающее влияние оказывает цистеин и альбумин. Установлено, что при прочих равных условиях НЧС-ЦТАБ, наименее подвержены мешающему влиянию посторонних веществ.
4. Другие флавоноиды не вызывают увеличения сигналов РРС или ФЛ, даже если присутствуют в больших концентрациях (2.5×10-6 М для рутина, 2.5×10-5 М для нарингенина и дигидрокверцетина). При совместном с кверцетином присутствии в соотношении 1:1 (с=5×10-7 М) флавоноиды не влияют на определение кверцетина. При увеличении содержания рутина (2:1), нарингенина (5:1) или дигидрокверцетина (50:1) в двухкомпонентных смесях с кверцетином наблюдается синергетическое увеличение сигнала.
5. Определено содержание кверцетина в лекарственном препарате «Activated Quercetin» и в экстракте шелухи желтого лука методом градуировочного графика и методом добавок.