|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИПМех РАН |
||
Изучение структуры ацил-интермедиата тазобактама в активном центре бета-лактамазы ТЕМ типадипломная работа (Специалист)
- Научные руководители: Григоренко В.Г., Рубцова М.Ю.
- Автор: Лебедев Г.В.
- Тип: Специалист
- Организация, в которой проходила защита: МГУ имени М.В. Ломоносова
- Год защиты: 2020
- Аннотация: Актуальность работы. В настоящее время эффективность применения бета-лактамных антибиотиков, наиболее широко применяемого класса антибиктериальных препаратов, ограни-чена распространением устойчивых к ним штаммов бактерий. Основным механизмом рези-стентности к бета-лактамам является продукция бактериальных ферментов – бета-лактамаз, ко-торые гидролизуют амидную связь в бета-лактамном кольце антибиотика. Общим подходом для преодоления резистентности, обусловленной бета-лактамазами, яв-ляется совместное использование определённых комбинаций бета-лактамных антибиотиков с соответствующими ингибиторами. Так в настоящее время в клинической практике используют-ся три ингибитора сериновых β-лактамаз класса А: сульбактам, клавулановая кислота и тазобак-там. Добавление тазобактама к ампициллину, амоксициллину, тикарциллину или пиперацилли-ну делает их активными в отношении многих видов бактерий, продуцирующих β-лактамазы. Изучение детального молекулярного механизма реакции гидролиза тазобактама имеет фунда-ментальное и практическое значение для повышения эффективности ингибирования бета-лактамаз и преодоления резистентности микроорганизмов к антибиотикам. Цель и задачи работы. Дипломная работа Лебедева Г.В. посвящена изучению конформа-ционных превращений интермедиата тазобактама в активном центре бета-лактамазы ТЕМ-типа, а также определению константы стадии деацилирования в реакции гидролиза тазобактама. Задачи работы: 1) экспериментальное подтверждение данных рентгеноструктурного анализа 2-х компле-сов бета-лактамазы ТЕМ-171 с тазобактамом; 2) методами молекулярной динамики проанализировать 2 полученные кристаллические структуры комплексов интермедиатов тазобактама с бета-лактамазой ТЕМ-171. Результаты дипломной работы: Используя методы спектрометрии, в том числе тушение флуоресценции, была экспери-ментально подтверждена одна из ранее полученных кристаллических структур комплекса бета-лактамазы ТЕМ-171 с тазобактамом; определены константы деацилирования комплеса реакции гидролиза тазобактама. Методами молекулярной динамики были проанализированы две полу-ченные ранее кристаллические структуры комплексов интермедиатов тазобактама на основе че-го был сделан вывод об их соответствии двум разным состояниям реакции гидролиза. На основе данных stop-flow спектрофотометрии был сделан вывод о временном различие 2-х структур. На основании полученных данных Лебедевым Г.В. была сформулирована гипотеза о ходе реакции бета-лактамазы ТЕМ-171 с тазобактамом.
- Добавил в систему: Григоренко Виталий Георгиевич