|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИПМех РАН |
||
Пространственная структура и взаимодействие MyD88 с внутриклеточнымидоменами TLRдипломная работа (Бакалавр)
- Научные руководители: Воейков Владимир Леонидович, Гончарук Марина Валерьевна
- Автор: Талызина Ирина Александровна
- Тип: Бакалавр
- Организация, в которой проходила защита: МГУ имени М.В. Ломоносова
- Год защиты: 2020
- Аннотация: 1) Собраны экспрессионные конструкции для бактериального получения полноразмерного белка MyD88 в составе с His6-тагом или белком-носителем MBP на N конце молекулы; домена смерти MyD88 с His6-тагом и TIR-домена MyD88 с His6-тагом, белком-носителем Trx или GST на N концах молекул. 2) Оптимизированы условия выращивания рекомбинантных штаммов E. coli для максимизации выходов растворимого полноразмерного MyD88, домена смерти и TIR-домена MyD88 в составе с His6-тагом и/или белками-носителями. 3) Разработаны протоколы очистки полноразмерного MyD88, домена смерти MyD88, TIR-домена MyD88. 4) Выход полноразмерного MyD88 составил не менее 2 мг/л М9, TIR-домена MyD88 — около 1 мг/л М9, домена смерти MyD88 — не ниже 10 мг/л. 5) Образование олигомеров молекулами полноразмерного MyD88 в растворе показано при помощи аналитической гель-фильтрационной хроматографии. 6) Олигомеризация домена смерти MyD88 в растворе подтверждена при помощи аналитической гель-фильтрации, методами динамического светорассеяния и спектроскопии ЯМР высокого разрешения. 7) Нативность вторичной структуры домена смерти MyD88 подтверждена методом спектроскопии кругового дихроизма.
- Добавил в систему: Воейков Владимир Леонидович