Разработка методик определения микотоксинов зеараленона, дезоксиниваленола, афлатоксина В1 и охратоксина А в зерне методом поляризационного флуоресцентного иммуноанализадипломная работа (Специалист)
Аннотация:1. Синтезированы трейсеры на зеараленон (ЗЕН), деоксиниваленол (ДОН), афлатоксин В1 (АФВ1) и охратоксин А (ОТА) для проведения поляризационного флуоресцентного иммуноанализа (ПФИА) на эти соединения. Все трейсеры протестированы на предмет связывания с соответствующими специфическими антителами и подобраны оптимальные для анализа пары иммунореагентов. Структура оптимальных трейсеров подтверждена методом жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием. Было выявлено, что среди исследуемых меток наиболее перспективными являются этилендиаминтиокарбомилфлуоресцеин и 4-аминометилфлуоресцеин.
2. Разработаны методики определения зеараленона, деоксиниваленол, афлатоксин В1 и охратоксин А с помощью ПФИА. Рассчитаны аналитические характеристики для каждого микотоксина. Пределы обнаружения в модельной системе для ЗЕН, ДОН, АФВ1 и ОТА составили 3 нг/мл, 36 нг/мл 1.5 нг/мл и 2 нг/мл соответственно.
3. Отработана методика универсальной пробоподготовки образцов зерна и проведено параллельное определение зеараленона, деоксиниваленол, афлатоксин В1 и охратоксин А в реальных образцах. Пределы обнаружения в зерне составили 15 мкг/кг, 180 мкг/кг, 7.5 мкг/кг и 10 мкг/кг соответственно.