|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИПМех РАН |
||
ПОЛЯРИЗАЦИОННЫЙ ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЙ ИММУНОАНАЛИЗ АТРАЗИНА И МЕРКАПТУРАТА АТРАЗИНАдипломная работа (Специалист)
- Научный руководитель: Еремин С.А.
- Автор: Лебедев Михаил Юрьевич
- Тип: Специалист
- Организация, в которой проходила защита: МГУ имени М.В. Ломоносова
- Год защиты: 1999
- Аннотация: 1. Разработан метод поляризационного флуоресцентного иммуноанализа детекции пестицида атразина, отличающийся высокой чувствительностью, специфичностью и экспрессностью проведения, который может применяться для определения атразина в образцах воды из природных источников. Изучено влияние структуры заместителя в положении 6 триазинового кольца меченого флуоресцеином производного атразина (трейсера) на характеристики разработанного иммуноанализа. Показано, что наиболее эффективно при разработке ПФИА атразина использовать трейсер с изопропильным боковым радикалом. 2. Исследована возможность использования рекомбинантных антител при разработке ПФИА атразина. Показано, что разработанный анализ с рекомбинантными антителами обладает большей чувствительностью, нежели анализ с моноклональными антителами. Установлено, что рекомбинантные антитела на атразин способны менее эффективно связывать антиген, чем моноклональные и поликлональная антисыворотка. Константа связывания составила величину 1,7•106M-1, в то время как для моноклональных антител эта характеристика составляет величину 3,1•109 М-1. При этом кинетические закономерности комплексообразования антигена с рекомбинантными и моноклональными антителами сильно различаются между собой. Константа скорости прямой реакции для рекомбинантных антител k1 = 1,0•104 M-1c-1, а константа скорости диссоциации комплекса k-1 = 1,5•10-3 c-1. 3. Разработан высокочувствительный метод поляризационного флуороиммуноанализа определения метаболита атразина - меркаптурата атразина с пределом обнаружения 3 нг/мл. Показано, что при помощи разработанного метода возможна точная и экспрессная детекция меркаптурата атразина в реальных образцах.
- Добавил в систему: Еремин Сергей Александрович