|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИПМех РАН |
||
Термогенетическая активация нейронов и астроцитов в первичной клеточной культуре эмбрионального гиппокампа мышейдипломная работа (Бакалавр)
- Научные руководители: Подгорный Олег Владимирович, Воейков Владимир Леонидович
- Автор: Солюс Екатерина Максимовна
- Тип: Бакалавр
- Организация, в которой проходила защита: МГУ имени М.В. Ломоносова
- Год защиты: 2021
- Аннотация: Изучали активацию TRPV1 -- термочувствительных каналов семейства TRP в клеточных линиях HeLa Kyoto и HEK293 путем визуализации изменения уровня кальция с помощью генетически кодируемого флуоресцентного сенсора GCaMP6s в ответ на различные условия нагрева. Полученные результаты показали, что для активации канала достаточно повышения температуры до 41℃. Затем с помощью методов молекулярного клонирования мы создали конструкции с TRPV1 под специфичными для нейронов и астроцитов промоторами – CaMKIIa и gfa2. Эти конструкции в дальнейшем были упакованы в аденоассоциированные вирусы и использованы для трансдукции первичной культуры эмбрионального гиппокампа мыши. После этого клетки первичной культуры подвергались термоактивации с разными режимами нагрева. Активацию нейронов и астроцитов оценивали по флуоресцентному сигналу генетически кодируемого кальциевого сенсора GCaMP6s. В результате было показано, что повышение температуры до 41℃ достоверно вызывает поступление ионов кальция в нейроны и астроциты первичной культуры. Таким образом, наша работа показывает, что TRPV1 человека является перспективным для использования его в качестве термогенетического инструмента на клетках млекопитающих.
- Добавил в систему: Воейков Владимир Леонидович