Роль взаимодействия терминальных эмиттеров и оранжевого каротиноидного протеина в процессах нефотохимического тушения флуоресценции фикобилисом Synechocystis PCC6803дипломная работа (Специалист)
Аннотация:У цианобактерий функцию светособирающей антенны выполняют фикобилисомы состоящие из фикобилипротеинов. При высоких интенсивностях света возрастает вероятность образования свободных радикалов, для предотвращения чего существует система нефотохимического тушения флуоресценции. У цианобактерий эффектором и регулятором этого процесса является оранжевый каротин-протеин (OCP), механизмы взаимодействия которого с фикобилисомами до сих пор не установлены.
Для исследования был выбран мутант цианобактерии Synechocystis PCC6803 ΔPSI/ΔPSII, у которого отсутствуют обе фотосистемы и, соответственно, фотохимическое тушение. Таким образом, цепь переноса энергии в фикобилисомах мутанта состоит из следущих белков: фикоцианин (ФЦ), аллофикоцианин (АФЦ) и терминальный эмиттер (ТЭ). При облучении интенсивным сине-зеленым светом OCP переходит из оранжевой в красную форму, которая способна тушить флуоресценцию фикобилисом.
Темно- и светоадаптированные образцы были заморожены в жидком азоте, после чего при возбуждении пикосекундным лазером (405 нм, Δt = 25 пс, 50 МГц) с помощью метода счета фотонов регистрировали кинетики затухания флуоресценции в диапазоне температур от -180 °С до +25 °С. Эффективность переноса энергии оценивали по изменению среднего времени жизни флуоресценции фикобилипротеинов. Установили, что при уменьшении температуры до -180 °С происходит увеличение эффективности переноса энергии от АФЦ к ТЭ.
Показано, что при комнатных температурах наблюдается значительное тушение флуоресценции АФЦ, однако при -180 °С тушение флуоресценции АФЦ отсутствует. Полученные результаты позволяют предположить, что OCP взаимодействует именно с ТЭ. Данные результаты важны для понимания механизмов возникновения нефотохимического тушения у цианобактерий.