Аннотация:В организмах далеко не все гены активны или экспрессируются одинаково. В разных тканях и органах существуют специальные системы регуляции экспрессии генов, в результате функционирования которых происходит избирательная работа транскрипционного комплекса. Так, например, во время эмбрионального развития происходит нейрогенез, в процессе которого большое количество генов экспрессируется последовательно. Среди множества транскрипционных факторов, регулирующих данный процесс, был выделен белок ROW (relative of woc) у Drosophila melanogaster. Вместе со своим партнером WOC (without children) он участвует в регуляции экспрессии многих генов в процессе морфогенеза (Abel et al. 2009).
В Лаборатории Регуляции Генетических Процессов ИБГ РАН была показана способность белка ROW взаимодействовать с многими транскрипционными факторами. Одним из таких факторов является белок MSL1 (male-specific lethal 1), компонент комплекса дозовой компенсации (КДК) у D. melanogaster. Помимо этого, оказалось, что ROW и MSL1 имеют несколько общих белков-партнеров. Также ROW взаимодействует с CG10654, CG11906, CG9793 и другими белками, для которых была показана способность связываться с КДК.
Таким образом, ROW, с одной стороны, выполняет регуляторную функцию в процессе нейрогенеза; с другой стороны, он каким-то образом связан с процессом дозовой компенсации у D. melanogaster. Целью данной работы стало исследование роли белка ROW в регуляции экспрессии генов в процессе дозовой компенсации у D. melanogaster.
Выводы
1. В дрожжевой двугибридной системе были выявлены взаимодействующие с различными транскрипционными факторами участки белка ROW: 236 602 а.о., 715-740 а.о. и 984 1024 а.о.;
2. Была определена способность ROW образовывать димеры, что, вероятно, является способом повышения эффективности привлечения регуляторных комплексов на хроматин;
3. С помощью системы редактирования генома CRISPR/Cas9 была подготовлена платформа для дальнейшего получения трансгенных линий D. melanogaster, содержащих делеции взаимодействующих с исследуемыми в данной работе транскрипционными факторами участков ROW;
4. Было доказано, что мутанты D. melanogaster с делецией row в гомозиготе нежизнеспособны и погибают на личиночной стадии.