|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИПМех РАН |
||
Получение и изучение свойств белка ядерного экспорта вируса гриппа А (NEP)дипломная работа (Специалист)
- Научные руководители: Баратова Л.А., Королева О.Н.
- Автор: Головко А.О.
- Тип: Специалист
- Организация, в которой проходила защита: МГУ имени М.В. Ломоносова
- Год защиты: 2014
- Аннотация: Целью работы являлось получение рекомбинантного белка NEP и изучение его физико-химических свойств, а также взаимодействия с М1. В результате проведенных экспериментов: - получена серия плазмидных векторов, позволяющая получать NEP и его мутантные варианты (W78G иW78Y,) с аффинным His-модулем и без него; - получены продуценты соответствующих белков и исследовано распределение экспрессируемых белков в цитоплазме и в «тельцах включения» в зависимости от их структуры; разработана оригинальная технология выделения белка NEP на основе растворения «телец включения» в растворе SDS; - изучены агрегационные и структурные свойства полученых белковых препаратов, показано, что белок NEP находится в растворе в виде агрегатов, включающих в себя не менее 50-60 мономеров; - выделенные белковые препараты использованы для получения первых данных in vitro о взаимодействии белка NEP с матриксным белком M1, показали невозможность использования этого подхода для получения комплекса M1-NEP. - получена плазмидная конструкция, содержащей опероны белка M1 и hNEP, для одновременной синхронной экспрессии in vivo. Полученные данные могут служить основой для дальнейших исследований и разработки подходов, позволяющих детектировать взаимодействие NEP и M1.
- Добавил в систему: Королева Ольга Николаевна