Аннотация:Целью данной работы было исследование влияния 6S-1 РНК на эффективность биосинтеза сурфактина в клетках B. subtilis. В качестве объектов исследования нами были выбраны бактерии B. subtilis двух штаммов: NCIB 3610 и PY79. Штамм NCIB 3610 является полностью природным, был выделен из почвы и не подвергался никаким геномным модификациям; штамм PY79 – лабораторный, часто используется в научной практике как модельная грамм-положительная бактерия. Для достижения намеченной цели был поставлен ряд задач, включающий в себя оценку влияния нокаута гена 6S-1 РНК на уровень транскрипции генов оперона srfA и его регуляторов, сравнение количества синтезируемого сурфактина бактериями B. subtilis в клетках дикого типа и с нокаутом гена 6S-1 РНК и характеристика используемых в данной работе штаммов B. subtilis как потенциальных продуцентов сурфактина.
Новизна работы заключается в том, что впервые получены данные об участии 6S-1 РНК в регуляции процесса биосинтеза сурфактина. Стоит отметить, что нокаут гена 6S-1 РНК не приводит к летальным последствиям для клетки, поэтому полученные результаты могут стать основой альтернативного, менее энерго- и ресурсозатратного метода суперэкспрессии сурфактина, что, в конечном итоге, позитивно скажется на степени его интегрированности в промышленность.
Обнаружено влияние 6S-1 РНК на транскрипцию генов оперона srfA, кодирующего субъединицы сурфактин-синтетазы, в клетках B. subtilis PY79 и NCIB 3610 в стационарной фазе роста;
Показана неспособность штамма B. subtilis PY79 продуцировать сурфактин из-за мутации в гене sfp, необходимом для синтеза сурфактина;
Проведена характеристика штаммов B. subtilis PY79 и NCIB 3610 как потенциальных штаммов-основ для конструирования промышленных продуцентов сурфактина;
Показано, что делеция гена 6S-1 РНК не влияет на эффективность биосинтеза сурфактина в клетках B. subtilis NCIB 3610. Вероятно, данный факт объясняется влиянием 6S-1 РНК на другие системы клетки, в частности недостатком глутаминовой кислоты, вызванным удалением 6S-1 РНК из клетки.