|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИПМех РАН |
||
Биофизические подходы к модификации криопротектора для суспензий клеток дипломная работа (Магистр)
- Научный руководитель: Симоненко Е.Ю.
- Автор: Григорьева Анастасия Александровна
- Тип: Магистр
- Организация, в которой проходила защита: МГУ имени М.В. Ломоносова, кафедра биофизики физического факультета
- Год защиты: 2017
- Аннотация: Магистерская диссертация Григорьевой А.А. посвящена разработке метода модификации криопротектора для клеточной суспензии гамет человека. Несмотря на широкую область применения и высокую практическую значимость метода криоконсервации гамет человека некоторые аспекты процесса криоконсервации клеток, а также механизмы действия эффективных компонентов криопротекторов и их модификаций остаются не до конца ясными. Для достижения наибольшей эффективности криозащитных свойств, чаще всего используются комплексные криопротектанты, содержащие, как проникающие (глицерин, ДМСО, пропиленгликоль), так и непроникающие (дисахариды, белки) компоненты, но, несмотря на их применение, выживаемость клеток после криоконсервации остаётся достаточно низкой. Одним из наиболее подверженных повреждениям при криоконсервации компонентов клетки является плазматическая мембрана; однако, существующие комплексные крипротектанты чаще всего не содержат веществ, направленных на стабилизацию именно этой клеточной структуры. Основной задачей исследования Григорьевой А.А. была разработка модификации существующего комплексного криопротектанта непроникающими компонентами, направленными на защиту плазматических мембран от криоповреждений, а также определение возможных механизмов действия предложенных модификаций. В работе Григорьевой А.А. предложены протокол модификации базового криопротектора эмульсией желтка (5,6 мг/мл), протокол модификации фосфатидилхолином (1,5 мг/мл), проведена криоконсервация более 50 образцов эякулятов доноров, проанализированы жизненные показатели клеток: подвижность, морфология, целостность плазматических мембран, проведено сравнение с доступными коммерческими аналогами. В результате проведенных исследований показано, что предложенные модификации криопротектора не только улучшают выживаемость клеток после заморозки, но и сохраняют клетки лучше коммерческих аналогов в среднем на 10-12%. Показано, что добавление желтка повышает целостность мембран на 15%. Предложен анализ необходимой концентрации холестерина в растворе криопротектора для поддержания его исходной концентрации в плазматической мембране в случае ее изменении во время криоконсервации.
- Добавил в систему: Симоненко Екатерина Юрьевна