Синтез и изучение физико-химических свойств соевого ингибитора трипсина, иммобилизованного на наноалмазах, взаимодействие с опухолевыми клетками.дипломная работа (Специалист)
Аннотация:В настоящее время актуальным является доставка лекарственных веществ в организм. Одним из таких способов служит иммобилизация препаратов на различных носителях, в качестве которых могут использоваться частицы детонационных наноалмазов.Известно, что частицы наноалмазов имеют функционализированную поверхность, пригодную для ковалентной прививки физиологически активных белков, при этом являются нетоксичными и биосовместимыми с организмом. Поэтому синтез и изучение физико-химических и биологических свойств таких соединений представляет научный интерес.
Соевый ингибитор трипсина Кунитца является близким аналогом бикунина, ингибитора человека, который обладает антиметастатической активностью, однако он не способен проникать внутрь клетки. Иммобилизация ингибитора на наноалмазах позволяет открыть новые возможности использования этого соединения.Конъюгат наноалмаза с ингибитором Кунитца в научной литературе не описан. Способ получения данного конъюгата заключается в иммобилизации на наноалмазе белка путём ковалентного связывания с поверхностью наноалмаза.Количество соевого ингибитора трипсина при его иммобилизации на наноалмазе определяли методом аминокислотного анализа. Включение белка составило 30%. Результаты аминокислотного анализа соответствуют данным, приведенным в литературе. Активность ингибитора определяли по степени ингибирования трипсина по хромогенному субстрату Bz-Arg-pNA. При соотношении 1:3 фермента к ингибитору активности конъюгата и нативного белка в 7-9 раз ниже. Действие нано-ингибитора более специфично по отношению к трипсину и менее выражено по отношению к химотрипсину.рН-оптимум нативного и иммобилизованного ингибиторов совпадают и находятся в диапазоне рН 6-10. При рН 5 нативный ингибитор более стабилен, чем конъюгат, при рН 11 – оба вещества одинаково устойчивы. Температурный оптимум конъюгата сдвинут в область более высоких температур по сравнению с нативным ингибитором.