Аннотация:Цель данной работы – характеристика свойств и физиологического значения полиферментного комплекса 2-оксоадипатдегидрогеназы мозга крыс.
Задачи:
1. Исследовать регуляцию 2-оксоадипатдегидрогеназного комплекса при введении животным тиамина и фосфоновых аналогов субстрата.
2. Определить физиологические состояния, при которых изменяется функция и/или белковая экспрессия ОАДГ мозга крыс.
3. Изучить взаимосвязь функции ОАДГ, метаболизма аминокислот и экспрессии деглутарилазы сиртуина 5.
4. Получить рекомбинантную ОАДГ для характеристики свойств изолированного фермента.
По результатам работы сделаны следующие выводы:
1. Спинальная травма влияет на 2-оксоадипатдегидрогеназу в коре головного мозга крыс. Данное влияние блокируют фосфоновые аналоги 2-оксоадипата, но не тиамин.
2. Уровень белковой экспрессии деглутарилазы сиртуина 5 в коре головного мозга растет после травмы спинного мозга и/или введения животным как активаторов, так и ингибиторов 2-оксоадипатдегидрогеназы.
3. После тяжелой травмы спинного мозга изменения активности 2-оксоадипатдегидрогеназы сопряжены с изменениями глутатиона, орнитина, цитруллина, цистатионина и цистина.
4. С помощью сверхэкспрессии гена DHTKD1 человека в клетках Escherichia coli BL21(DE3), не обладающих измеряемым уровнем 2-оксоглутарат- или 2-оксоадипатдегидрогеназных активностей, показано, что при насыщающих концентрациях субстратов изолированная 2-оксоадипатдегидрогеназа катализирует реакцию с 2-оксоглутаратом на уровне 60% от скорости с 2-оксоадипатом.