Разработка нового подхода для определения каталитической активности L-аспарагиназы в сыворотке крови с применением ИК-спектроскопиикурсовая работа (Специалист)
Аннотация:Бактериальные аспарагиназы более 30 лет применяются в онкологической практике при комбинированной химиотерапии различных видов лейкозов, меланом и миелом. Механизм противоопухолевого действия L-аспарагиназы заключается в расщеплении межклеточного L-аспарагина, вследствие чего концентрация аспарагина падает. L-Аспарагин – незаменимая аминокислота и для продолжения нормальной жизнедеятельности здоровые клетки восстанавливают баланс L-аспарагина за счет действия аспарагинсинтазы. У опухолевых лимфобластов активность L-аспарагисинтазы снижена или вовсе отсутствует, поэтому клетка погибает.
Таким образом, механизм цитотоксичности L-аспарагиназы не подразумевает контакта или проникновения токсичного вещества в раковую клетку, что принципиально отличает аспарагиназу от других противоопухолевых препаратов.
Однако использование препаратов аспарагиназы для лечения ограничено некоторыми побочными эффектами, поэтому только аспарагиназа из E.coli и Erwinia chrysanthemi нашли применение в онкотерапии. Введение белкового препарата из бактериального источника способно спровоцировать развитие иммунологической гиперчувствительности к L-аспарагиназе от слабых аллергических реакций до анафилактического шока. Иммуный статус пациентов сильно различается, поэтому необходимо постоянно следить за активностью аспарагиназы в крови каждого пациента. В настоящее время не существуют методов, которые позволили бы проводить анализ непосредственно в сыворотке крови. Используемые в настоящий момент методы несслеризации, ВЭЖХ и другие требуют тщательной и трудоемкой пробоподготовки.
Таким образом, представляется актуальным создание новых методов определения кинетической активности фермента. Целью данной работы является разработка нового метода определения активности L-аспарагиназы в сыворотке крови с помощью ИК спектроскопии.