|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИПМех РАН |
||
Кинетика гидролиза и трансгликозилирования инулина под действием экзоинулиназы из Penicillium verruculosum Inu13курсовая работа (Специалист)
- Научные руководители: Зоров И.Н., Хохлов Д.В.
- Автор: Милова Евгения Сергеевна
- Тип: Специалист
- Организация, в которой проходила защита: МГУ имени М.В. Ломоносова
- Кафедра: Кафедра физической химии
- Год защиты: 2021
- Курс: 4
- Аннотация: Инулин – углевод, состоящий из фруктоолигосахаридов. Инулин содержится в цикории, корневищах георгина, в клубнях топинамбура, который является популярной сырьевой культурой в пищевой промышленности. Инулин является сырьем для производства многих биотехнологически важных продуктов, таких как фруктоза, фруктозный сироп, лимонная, молочная и фумаровая кислота, а также биотопливо. Пребиотики являются пищевыми ингредиентами, которые не перевариваются и не усваиваются в верхних отделах желудочно-кишечного тракта, но могут проявлять полезные свойства для здоровья человека за счет изменения кишечной микрофлоры в направлении стимулирования полезных бактерий и ингибирования вредных бактерий. Инулин и фруктоолигосахариды, вероятно, являются наиболее часто используемыми пребиотиками. Были выявлены такие их положительные свойства, как предотвращение кишечной инфекции, стимулирование иммунной реакции, предотвращение колоректального рака, снижение уровней холестерина в крови и увеличение биодоступности нутриентов Экзоферменты – ферменты, отщепляющие моно- и дисахариды от концов полисахаридных соединений. К этому классу ферментов относится экзоинулиназа. Экзоинулиназа участвует в утилизации инулина, последовательно отщепляя концевые звенья фруктозы от невосстанавливающего конца молекулы инулина, а также гидролизует сахарозу и раффинозу. Многие ферменты экзодействия, помимо реакции гидролиза, могут участвовать в реакциях трансгликозилирования, то есть присоединения молекул нуклеофила к олигосахаридной цепи. Таким образом, целью исследования было изучение кинетики гидролиза и трансгликозилирования под действием экзоинулиназы из рекомбинантного штамма Penicillium verruculosum INU13. Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи: 1. Выделение индивидуальной инулиназы. 2. Определение удельной активности. 3. Определение температурного оптимума действия. 4. Определение каталитической константы гидролиза инулина. 5. Определение константы трансгликозилирования. В результате выполнения работы были получены следующие результаты: 1. Был выделен и очищен фермент экзоинулиназа. 2. Построена температурная зависимость активности фермента. Максимальная активность наблюдалась при температуре 52 оС 3. Определены константа Михаэлиса и максимальная скорость для реакции гидролиза инулина, катализируемой данным ферментом. Км составила 35,1+1,7 г/л, а Vmax - 1090+54 г/(л*мин) 4. Установлена способность данного фермента катализировать реакцию трансгликозилирования. Были обнаружены олигосахариды со степенью полимеризации от 3 до 8. 5. Константа скорости реакции трансгликозилирования оказалась в 26 раз больше константы скорости гидролиза для сахарозы.
- Добавил в систему: Зоров Иван Никитич