Выделение и изучение особенностей функционирования промоторной области метанол-индуцируемого гена 21 (MIG-21) Nicotiana benthamianaкурсовая работа (Специалист)
Аннотация:Система защиты растений включает в себя организацию связи между соседними растениями и различными частями одного и того же растения. Для осуществления такой связи в отсутствие физического контакта, растения используют летучие органические соединения (ЛОС). И в том числе газообразный метанол, образующийся в процессе деметилирования пектина клеточных стенок пектинметилэстеразой.
Выделяемый растениями газообразный метанол индуцирует экспрессию ряда генов, продукты которых участвуют в обеспечении защитных реакций в клетке. Одним из таких генов является недавно идентифицированный MIG-21 (methanol inducible gene 21) из растения Nicotiana benthamiana. Ранее было показано, что экспрессия этого гена активируется в ответ на инкубацию растения при повышенной, но физиологической концентрации газообразного метанола. Целью данной работы было выделение промоторной области гена MIG21, определение и анализ его последовательности, а также оценка активности в растении Nicotiana benthamiana. 1. Выделить промоторный участок гена MIG-21 хромосомной ДНК Nicotiana benthamiana. Определить его нуклеотидную последовательность.
2. Провести биоинформационный анализ предполагаемого промотора гена MIG-21 с предсказанием cis-элементов, регулирующих его работу.
3. Создать генноинженерные конструкции, в которых синтез мРНК репортёрного гена CFP находится под регуляцией транскрипционного промотора гена MIG-21.
4. Проверить эффективность экспрессии репортёрного гена CFP при воздействии повышенных концентраций газообразного метанола